lncRNA PART1通过miR-204-3p/IGFBP2轴促进非小细胞肺癌的实验研究

来源 :临床肺科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shshay
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目的 通过体外细胞研究和动物研究,探讨长链非编码RN A前列腺雄激素调节转录本1(PART1)通过miR-204-3p/胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)轴对非小细胞肺癌(NSCLC)的影响.方法 用RT-PCR法检测NSCLC细胞系A549和PC9,肺腺癌细胞系H1299、H1650和H1975,人正常支气管上皮细胞系(HBE)中PART1的相对表达量.对A549细胞转染shRNA-NC或shRNA-PART1,分析敲降PART1对癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,将10只BALB/c裸鼠随机分为sh-NC组和sh-PART1组,分析PART1对肿瘤增殖的影响.用双荧光素酶报告基因验证PART1、miR-204-3p和IGFBP2的靶向作用关系.对A549细胞分别仅转染shRNA-PART1、同时转染PART1-shRNA+miR-204-3p inhibitor、同时转染PART1 shRNA+pcDNA-IGFBP2,分析PART1通过miR-204-3p/IGFBP2轴,对细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响.克隆形成实验和CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,体外损伤愈合实验检测细胞迁移.结果 与HBE细胞比较,A549、H1299、H1650、H1975和PC9细胞中PART1相对表达量明显较高(P<0.05).敲降PART1可以明显抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.05).在动物实验中,抑制PART1的表达可以明显降低肿瘤的体积和重量(P<0.05).双荧光素酶报告基因检测证实,PART1靶向作用于miR-204-3p并下调其表达,miR-204-3p可负调控IGFBP-2的表达.敲降PART1表达可以明显抑制A549细胞中IGFBP-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05).同时,转染PART1-shRNA+miR-204-3p inhibitor或者PART1 shRNA+pcDNA-IGFBP2后,IGFBP-2 mRNA和蛋白的表达水平较仅转染PART1-shRNA明显上调(P<0.05),细胞增殖、侵袭和迁移能力也明显升高(P<0.05).结论 通过体外细胞研究和动物研究,本研究证实PART1可通过调控miR-204-3p/IGFBP2轴促进NSCLC的进展.
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慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmo-nary disease,慢阻肺)是常见的以持续的呼吸道症状和气流受限为特征的肺部疾病.最新流行病学调查结果显示,我国20 岁及以上人群慢阻肺患病率为8. 6%,40岁及以上人群慢阻肺患病率为13. 7%,由此来估计全国患病人数接近1 亿[1].慢阻肺已成为我国主要的致死原因之一,2013 年我国慢阻肺死亡人数约达91 万[2],而至2017年,慢阻肺死亡人数达3千万人(42. 2/10 万人),在非传染病性疾病中排第七位[3].
肺血栓栓塞症(pulmonary thromboembolism, PTE )的发病率逐年上升;一项多中心、回顾性的研究显示:与肺栓塞相关的患者7 天死亡率为1. 2%~2. 2%,30天死亡率为 1 . 8%~3. 4%[1 ].慢性血栓栓塞性肺动脉高压(chronic thromboembolic pul-monary hypertension,CTEPH)属于PTE 的一种远期并发症,确诊的患者若不进行规范性治疗或干预,2~3年生存率仅为10%~20%[2].CTEPH 的治疗主要包括以下几个方面:
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