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研究目的:本文通过研究长链非编码RNA TIF(long non-coding RNA TIF,lncRNA TIF)对阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的A549细胞系凋亡的影响,探讨lncRNA TIF在A549细胞的凋亡过程中发挥功能的具体机制,为肺癌的治疗提供新思路。研究方法:(1)采用高通量lncRNAs基因芯片技术,筛选2μM DOX处理组中差异表达的lncRNAs,同时通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术进行复筛。(2)检测19对肺癌组织和癌旁组织样本中lncRNA TIF的表达。(3)构建lncRNA TIF慢病毒过表达和敲低细胞系。(4)Mito Tracker线粒体染色法检测细胞线粒体分裂与融合情况。(5)流式技术检测细胞凋亡情况。(6)细胞划痕实验检测迁移情况。(7)通过RT-qPCR和Western blot技术探究lncRNA TIF和线粒体分裂蛋白OMA1的关系。结果:(1)根据基因芯片结果和复筛结果确定了差异表达显著的lncRNA,lnc-ZMYM6-2-1,我们命名为lncRNA TIF(Tumor Inhibitor Factor),作为目的lncRNA进行下一步研究。(2)与癌旁组织样本相比,肺癌组织样本中lncRNA TIF的表达下调(P<0.05)。(3)DOX处理能够促进A549细胞的线粒体分裂,而敲低lncRNA TIF后,能够抑制DOX引起的线粒体分裂。(4)DOX处理能够促进A549细胞的凋亡,而敲低lncRNA TIF后,能够抑制DOX引起的细胞凋亡。(5)敲低lncRNA TIF后,能够促进A549细胞的迁移能力。(6)过表达lncRNA TIF后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均上调;敲低lncRNA TIF后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均下调。(7)DOX处理后,OMA1在mRNA水平和蛋白水平的表达均上调。结论:在肺癌组织样本中lncRNA TIF的表达下调,而DOX处理的A549细胞中,lncRNA TIF的表达上调;lncRNA TIF能够促进A549细胞的凋亡,抑制细胞的迁移;OMA1具有促进线粒体分裂,促进细胞凋亡的功能,在DOX诱导的A549细胞凋亡过程中OMA1表达上调;lncRNA TIF的表达和OMA1的表达呈现正相关的关系。因此,lncRNA TIF在A549细胞的凋亡过程中发挥功能,其靶标分子可能是OMA1。为此lncRNA TIF可能为临床肺癌的治疗提供新的视野,作为新的靶点分子。