【摘 要】
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目的 构建靶向癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）的嵌合抗原受体C2-45/CAR,制备慢病毒，为CEA阳性肿瘤的细胞免疫治疗奠定研究基础。方法 通过基因重组技术将CEA scFv、CD8铰链区和跨膜区、共刺激分子CD137和CD3ζ克隆入慢病毒表达载体pCDH中（pCDH-C2-45/CAR）,酶切和测序鉴定，用慢病毒制备试剂盒合成慢病毒LV-C2-45/CAR
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目的 构建靶向癌胚抗原（carcinoembryonic antigen, CEA）的嵌合抗原受体C2-45/CAR,制备慢病毒，为CEA阳性肿瘤的细胞免疫治疗奠定研究基础。方法 通过基因重组技术将CEA scFv、CD8铰链区和跨膜区、共刺激分子CD137和CD3ζ克隆入慢病毒表达载体pCDH中（pCDH-C2-45/CAR）,酶切和测序鉴定，用慢病毒制备试剂盒合成慢病毒LV-C2-45/CAR,梯度稀释法测定病毒滴度，免疫印迹法（Western blotting）检测目的基因表达。结果 经转化、鉴定，慢病毒表达载体pCDH-C2-45/CAR构建成功；成功合成慢病毒LV-C2-45/CAR（对照LV-pCDH）,Western blotting检测显示慢病毒LV-C2-45/CAR感染293T细胞后可见C2-45/CAR表达。结论 靶向CEA嵌合抗原受体表达载体及慢病毒制备成功，为CAR修饰T细胞、NK细胞杀伤CEA阳性肿瘤研究奠定基础。
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