苹果多酚提取物通过激活SIRT1改善游离脂肪酸诱导的HepG2细胞脂质代谢紊乱

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目的 研究苹果多酚提取物(apple polyphenol extract, APE)对混合游离脂肪酸(free acid, FA)诱导的肝脏细胞脂肪变性的预防作用,并阐明其可能的作用机制。方法 以 HepG2 细胞为研究对象,利用FA诱导细胞内脂质沉积建立体外脂肪变性模型。CCK8 测定APE 对细胞的 IC50,根据 IC50 将HepG2 细胞分为四组干预 24 h:(1)对照组(CON);(2)混合游离 FA处理的模型组(FA);(3)低剂量 APE 干预组(FA+LAPE)和 (4)高剂量 APE 干预组(FA+HAPE)。利用油红 O 染色观察细胞内脂滴沉积情况,利用试剂盒测定细胞内脂质含量和氧化还原水平。qRT-PCR 和 Western blot 检测脂代谢相关基因 mRNA 和蛋白表达水平。进一步构建 SIRT1 小干扰 RNA后进行细胞转染,qRT-PCR 和 Western blot 检测沉默 SIRT1 表达后,APE 对细胞脂代谢相关基因 mRNA 和蛋白表达水平的影响。结果 APE干预可以预防和改善FA诱导的脂滴沉积和氧化还原状态失衡,通过激活SIRT1抑制脂肪酸合成,从而发挥调节脂代谢的作用。结论 APE可能是预防和改善肝脏脂肪变性的潜在天然物质。
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