目的 探讨WT1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)发病机制中的作用.方法 采用RT-PCR法检测CD59及CD59-骨髓单个核细胞(BMMNC)WT1 mRNA的表达水平;利用RNA干扰(RNAi)技术敲低WT1基因,采用流式细胞术检测WT1基因敲低前后BMMNC细胞周期及凋亡率.结果 PNH患者CD59细胞组、CD59+细胞组及正常对照组WT1 mRNA的相对表达量分别为1.06±0.12、0.90±0.12和0.86±0.05,CD59细胞组明显高于CD59+细胞组和正常对照组(P值均＜0.05),而CD59+细胞组和正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).PNH患者WT1 mRNA的相对表达量与CD59细胞数量呈正相关(r2=0.490,P=0.016),而与CD59+细胞数量无明显相关性.PNH患者骨髓CD59细胞转染靶向WT1基因小干扰RNA(siRNA)后,WT1 mRNA表达水平下降;PNH患者空白对照组和转染无义序列组(siRNA-scr转染组)G0/G1期细胞比例分别为(92.73±3.71)％和(93.06±4.14)％,S期分别为(6.99±3.61)％和(6.73±4.08)％;siRNA-WT1转染组G0/G1期细胞比例为(94.46±3.71)％,S期为(5.40±3.55)％,与空白对照组和siRNA-scr转染组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).siRNA-WT1转染组细胞凋亡率[(35.91±22.36)％]较空白对照组[(27.39±18.99)％]和siRNA-scr转染组[(26.12±17.10)％]明显增加(P＜0.05).结论 转染WT1 siRNA能有效抑制PNH患者CD59-细胞中WT1基冈的表达,减弱其增殖能力,促进其凋亡.WT1基因过表达可能参与PNH克隆的增殖过程。
WT1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症发病机制中的作用
【摘 要】
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目的 探讨WT1基因异常表达在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)发病机制中的作用.方法 采用RT-PCR法检测CD59及CD59-骨髓单个核细胞(BMMNC)WT1 mRNA的表达水平;利用RNA干扰(RNAi)技术敲低WT1基因,采用流式细胞术检测WT1基因敲低前后BMMNC细胞周期及凋亡率.结果 PNH患者CD59细胞组、CD59+细胞组及正常对照组WT1 mRNA的相对表达量分别为1.06±
【机 构】
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【出 处】
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中华血液学杂志
【发表日期】
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2014年35期
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