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胃癌是一种常见的恶性肿瘤,是由环境因素和特定遗传改变的积累共同引起的,是世界上癌症相关死亡的第三大常见原因,其发病率显示出广泛的地域差异,而我国为胃癌的高发地区,尽管其流行病学在过去几十年中发生了变化,但五年生存率仍很低,预后较差,目前手术治疗仍然是治疗胃癌的一线治疗方法,尽管在外科技术、放疗、化疗等方便取得了进步,但由于早期诊断率低,大多数患者表现为晚期胃癌,因此治疗效果仍较差。寻找新的诊断方法,提高胃癌的早期诊断率,发现并利用新的治疗靶点是未来方向。微小RNA（micro RNA,mi RNA）是一类含有约18-25个核苷酸的非编码小分子RNA,在细胞生物学方面发挥着重要的作用,可能影响胃癌细胞增殖、分化、迁移和凋亡等过程。mi R-5196-5p是新发现的一条全新的非编码微小RNA,前期研究表明其对胃癌的发生和发展起到重要的调控作用。本研究通过检测mi R-5196-5p对胃癌细胞增殖、凋亡以及迁移的作用,并实验验证其下游靶基因,从而初步探讨其影响胃癌发生和发展的作用机制,为诊断和治疗胃癌在新的基因靶点方面提供新的思路。目的:通过上调和抑制人胃癌MKN-45和HGC-27细胞中mi R-5196-5p的表达,探讨mi R-5196-5p对人胃癌细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭的影响及其作用机制,并确定mi R-5196-5p的下游靶基因。方法:（1）采用q RT-PCR法检测mi R-5196-5p在正常人胃粘膜GES-1细胞、低分化MGC-803细胞以及中低分化MKN-45、HGC-27细胞中的基础表达,并选取MKN-45和HGC-27细胞进行本项研究。（2）将胃癌细胞分为mi R-5196-5p mimic组及其阴性对照组（mimic NC）以及inhibitor组及其阴性对照组（inhibitor NC）,采用lipo3000脂质体转染法进行转染,将mi R-5196-5p mimic和阴性对照NC-mimic以及inhibitor和阴性对照NC-inhibitor分别转染两株胃癌细胞,转染后48h采用q RT-PCR法鉴定转染效率。（3）采用CCK-8法检测胃癌细胞的增殖能力。（4）采用流式细胞术检测胃癌细胞的周期及凋亡。（5）采用划痕试验及侵袭试验检测胃癌细胞的迁移及侵袭能力。（6）采用Western blot法检测Bcl-2、Bax、MMP-9、PCNA、Cleaved-caspase-3、Caspase-3、Cyclin D1、Vimentin等蛋白的表达,并检测MEK、p MEK、ERK、p ERK等通路蛋白的表达。（7）通过基因数据库预测了mi R-5196-5p可能的靶基因,采用q RT-PCR法检测其表达进行初步验证。（8）在选出的表达差异明显的待定靶基因中,通过双荧光素酶基因报告实验确定。结果:（1）mi R-5196-5p在人胃癌MKN-45、HGC-27、MGC-803中的表达均显著低于正常胃粘膜GES-1细胞,其中MKN-45、HGC-27中的表达较MGC-803高,差异有统计学意义（P＜0.05）。（2）在MKN-45、HGC-27两株细胞中转染mi R-5196-5p mimic后,mi R-5196-5p的表达显著上调,而在转染mi R-5196-5p inhibitor后,其表达显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（3）过表达mi R-5196-5p后,胃癌细胞增殖能力下降,凋亡能力提高,迁移及侵袭能力受到抑制,而在抑制其表达后,增殖能力提高,凋亡能力下降,促进了胃癌细胞的迁移和侵袭,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（4）过表达mi R-5196-5p后,Bax、Cleaved-caspase-3的表达显著上调,PCNA、Bcl-2、MMP-9、Cyclin D1、Vimentin的表达显著下调,而在抑制mi R-5196-5p的表达后,Bax、Cleaved-caspase-3的表达显著下调,PCNA、Bcl-2、MMP-9、Cyclin D1、Vimentin的表达显著上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）;过表达mi R-5196-5p后,p MEK、p ERK的表达显著下调,抑制mi R-5196-5p的表达后,p MEK、p ERK的表达显著下降,差异有统计学意义（P＞0.05）。（5）过表达mi R-5196-5p后,下游靶基因CDH6、Sp1表达显著下调,而抑制mi R-5196-5p的表达后,CDH6、Sp1的表达明显上调,差异均有统计学意义（P＜0.05）。（6）双荧光素酶基因报告试验证实mi R-5196-5p的下游靶基因为CDH6、Sp1,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:1、mi R-5196-5p可调控胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭;2、mi R-5196-5p通过MEK/ERK信号通路发挥作用;3、CDH6、Sp1是mi R-5196-5p的靶基因。