【摘 要】
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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA),是一种雌激素性真菌毒素,广泛存在于自然界,主要通过污染的粮食及食品进入体内,危害人类和动物的生殖健康,还具有其它潜在危害.为探讨ZEA的细
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玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA),是一种雌激素性真菌毒素,广泛存在于自然界,主要通过污染的粮食及食品进入体内,危害人类和动物的生殖健康,还具有其它潜在危害.为探讨ZEA的细胞毒性作用及机制,该课题采用MTT比色法、单细胞凝胶电泳(SCGE)技术和电子显微镜技术,利用先进的图像分析系统观察不同剂量ZEA对人宫颈癌(Hela)细胞的毒性作用、DNA损伤及超微结构的影响,得到如下结论:1、用MTT比色法观察ZEA对人宫颈癌(Hela)细胞的毒性效应,可见ZEA浓度为2μg/ml时,即有毒性作用,随着毒素剂量增大,其毒性作用增强,对细胞抑制率也随之增高,细胞抑制率与毒素剂量之间存在着明显的剂量反应关系,细胞半数抑制浓度(IC50)为19.05μg/ml.2、应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术,观察Hela细胞基因组DNA的损伤及修复情况,计算拖尾率,利用Komet 4.0图像分析系统,测定DNA尾长及尾长动差.与阴性对照组相比,各实验组的拖尾率、平均尾长和平均尾长动差有显著差别(P<0.01).结果表明,较低剂量ZEA即可引起细胞明显的DNA损伤,随着毒素剂量增加,DNA损伤加重,拖尾率、平均尾长和尾长动差都增加,以尾长动差增加更敏感,呈显著剂量效应关系,并存在修复现象.该项实验为ZEA致离体培养细胞DNA断裂损伤提供了直接的证据.3、细胞超微结构观察发现,低剂量组(5μg/ml)可见胞质内线粒体数量略增多,部分线粒体空泡变性和髓样变,游离核蛋白体和高尔基器减少,部分游离核蛋白体溶解成絮斑状.高剂量组(15μg/ml)可见细胞核固缩畸变崩解,形成高密度斑块,细胞表面微绒毛脱失,线粒体嵴絮状变,部分细胞核裂解后形成核碎片,细胞器结构紊乱.结果表明,低剂量组ZEA主要引起线粒体、核蛋白体和高尔基体等细胞器改变,高剂量组ZEA除线粒体损伤加重外,细胞核出现了类似凋亡样改变.ZEA是否可诱导Hela细胞凋亡还需要进一步证实.综上所述,ZEA在浓度很低时,对Hela细胞即有明显的毒性作用,从观察到的DNA损伤和超微结构改变可以推测其毒性效应可能主要是由细胞核介导的,线粒体也起着重要作用.
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