【摘 要】
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本试验采集内蒙古某疑似感染牛副流感病毒奶牛场的发病牛鼻拭子,处理后接种MDBK细胞,进行病毒分离培养,取产生稳定病变的毒液进行病毒鉴定,通过分子生物学、血清学、理化特性
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本试验采集内蒙古某疑似感染牛副流感病毒奶牛场的发病牛鼻拭子,处理后接种MDBK细胞,进行病毒分离培养,取产生稳定病变的毒液进行病毒鉴定,通过分子生物学、血清学、理化特性、电镜形态观察、基因进化系统分析、对牛的感染性及毒株免疫原性等方法进行鉴定。结果表明,该病毒可在MDBK细胞上增值并稳定产生病变;分离病毒为RNA病毒,且RT-PCR扩增产物的电泳条带与BPIV3目的基因片段大小一致;分离病毒可被BPIV3阳性血清中和,且对豚鼠的红细胞具有凝集作用,最低凝集效价不低于1:16,BPIV3阳性血清可抑制其对红细胞的凝集作用;该病毒对乙醚、氯仿有机溶剂十分敏感;经37℃处理60min,毒价显著下降;56℃处理60min、80℃处理30min,病毒完全被灭活;pH值低于5.0或者高于8.0,该病毒毒价显著下降。电镜观下,此病毒呈不规则形态,大小约为200nm左右;分离病毒经全基因序列测定及基因进化树比对分析,此毒株属于基因C型,且与SD0835同属于同一亚型;对牛的感染性实验中,该病毒可使牛发病,解剖后病理切片显示气管、肺部及淋巴结出现不同程度的病变。以上鉴定结果表明本研究分离的病毒属于牛副流感病毒3型,经进一步试验结果表明,本研究的分离的BPIV3病毒株具有良好的免疫原性。
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