论文部分内容阅读
目前,抗冻蛋白被认为具有热滞效应、重结晶抑制效应和冰晶形态效应,可以保护一些动植物免受低温冻伤。绒山羊精液的高效保存是促进绒山羊养殖业发展的重要技术,因此本实验研究了小麦抗冻蛋白(WAFP)和鱼类3型抗冻蛋白(AFP-Ⅲ)对内蒙古绒山羊精液冷冻和低温(5℃)保存的影响。内容如下:1、在冷冻稀释液中添加不同浓度WAFP(0、1、10、50、100、150、200μg/ml)和AFP-Ⅲ(0、1、10、50、100、150μg/ml)进行绒山羊精液冷冻保存,精液冷冻解冻后,利用精子分析仪检测精子的运动参数,利用流式细胞仪检测精子质膜和顶体完整率。结果表明:150μg/ml WAFP组解冻后精子活力(70.02±6.40)与对照组(69.80±2.84)没有显著差异(P>0.05),但是其直线运动精子率、质膜完整率、顶体完整率(分别为47.12±7.23、68.29±2.44、69.05±0.55)显著高于对照组(分别为37.47±3.68、61.33±2.31、63.21±1.08,P<0.05)。其它浓度 WAFP 组的各项指标与对照组没有显著差异;随着冷冻稀释液中AFP-Ⅲ浓度的增加,各组精子冷冻解冻后的运动参数、质膜和顶体完整率均逐渐下降,各浓度组的精子活力、平均路径速度、直线速度、曲线速度、质膜完整率和顶体完整率显著低于对照组(P<0.05);另外150μg/ml AFP-Ⅲ组的直线运动精子率显著低于对照组(分别为23.24±5.78和37.47±3.68,P<0.05)。以上结果表明在冷冻稀释液中添加适量(150μg/ml)WAFP可以改善内蒙古绒山羊精液冷冻保存效果,但添加AFP-Ⅲ不利于内蒙古绒山羊精液的冷冻保存。2、在低温保存稀释液中添加不同浓度WAFP(0、1、10、50、100、150、200μg/ml)和AFP-Ⅲ(0、1、10、50、100、150μg/ml)进行绒山羊精液低温(5℃)保存,利用精子分析仪检测精子的精子活力和直线运动精子率。结果表明:在低温保存稀释液中添加不同浓度WAFP后,随着保存时间的延长,各浓度WAFP组的保存效果都有不同程度的改善,其中50μg/ml和100μg/ml浓度组的精子活力在72h、96h和120h时分别为 67.10±5.98、62.33±1.61、56.52±1.52 和 70.14±1.47、62.63±5.95、59.25±7.22,均显著高于对照组(57.83±3.31、53.30±6.36、43.80±5.63,P<0.05)。100μg/ml WAFP组的精液在0-120h保存期间的直线运动精子率分别为59.58±6.32、55.98±7.00、53.00±1.99、47.23±3.85、47.98±7.34、34.56±0.85,均显著高于对照组的(分别为48.72±7.24、47.28±3.16、42.80±5.28、35.47±2.63、35.35±0.65、24.20±1.41,P<0.05);在低温保存稀释液中添加不同浓度AFP-Ⅲ后,随着保存时间的延长,各浓度AFP-Ⅲ组的保存效果都有不同程度的改善,其中50μg/ml浓度组的精子活力在72h、96h和120h 时分别为 69.98±1.10、66.14±2.27、58.34±1.62,均显著高于对照组(61.83±3.31、59.30±6.37、43.80±5.64,P<0.05)。添加AFP-Ⅲ对精液中直线运动精子率产生一定程度的有益的影响,其中50μg/ml AFP-Ⅲ组保存效果最好且稳定。其中50μg/ml浓度组的精液在0-120h保存期间的直线运动精子率分别为52.34±2.03、50.24±4.86、45.52±1.36、38.82±2.23、30.74±1.72,均显著高于对照组的(分别为 47.28±3.16、42.80±5.28、34.53±2.44、35.35±0.65、24.20±1.41,P<0.05)。以上结果表明在低温保存稀释液中添加适量WAFP(100μg/ml)或AFP-Ⅲ(50μg/ml)可以提高内蒙古绒山羊精液低温保存效果,延长保存时间。