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第一部分不同辐射剂量冠状动脉CT血管成像对DNA双链断裂影响的研究目的:利用免疫荧光显微镜和流式细胞仪评价不同辐射剂量冠状动脉CT血管成像(coronary CT angiography,CCTA)检查对外周血淋巴细胞DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)水平的影响。材料与方法:该研究共纳入180例行CCTA检查的患者,根据患者接受的有效剂量(约 1、3、5mSv)将其分为 A(A1、A2)、B(Bl、B2)、C(Cl、C2)三大组、六个亚组,每个大组60人,每个亚组30人;其中同一大组内两个亚组人群的人口学特征(年龄、性别、身高、体重、体质量指数[body mass index,BMI])及有效剂量的均无统计学差异(所有P>0.05)。所有纳入患者均在检查前及检查后20分钟分别抽血2ml。通过密度梯度离心法分离淋巴细胞后,A1、Bl、C1组患者的淋巴细胞进行γ-H2AX抗体免疫荧光染色,利用免疫荧光显微镜观察外周血淋巴细胞内的γ-H2AX荧光焦点的改变;A2、B2、C2组患者的淋巴细胞样品经CD3抗体、γ-H2AX抗体孵育后,利用流式细胞仪分析检查前后CD3阳性T淋巴细胞中γ-H2AX蛋白的平均荧光强度(geometric mean of fluorescence intensity,MFI)。卡方检验用于组间、亚组间性别比较,独立样本t检验及单因素方差分析用于组间及亚组间人群年龄、身高、体重、BMI及有效剂量的比较,Wilcoxon符号秩和检验方法用于检查后与检查前γ-H2AX水平变化情况的比较;Kruskal-Wallis秩和检验用于组间γ-H2AX水平变化情况的比较。P<0.05时视为有统计学意义。结果:A1和A2、B1和B2及C1和C2组间人口学特征及有效剂量无显著性差异(所有P>0.05)。经CCTA检查后,Al、Bl、Cl组外周血淋巴细胞中γ-H2AX荧光焦点分别增加0.08、0.09、0.11焦点/细胞(所有P<0.05)。A2、B2、C2组CD3阳性T淋巴细胞γ-H2AX的MFI分别增加7.34、9.53、12.74(所有P<0.05)。A1、Bl、C1组间及A2、B2、C2组间DNA损伤水平比较,随着辐射剂量降低,y-H2AX荧光焦点及CD3阳性T淋巴细胞γ-H2AX MFI的增加量均随之下降,但均无统计学意义(所有P>0.05)。结论:CCTA的有效剂量在1-5mSv范围内时,降低其辐射剂量不会引起DNA双链断裂程度的下降。第二部分不同管电压冠状动脉CT血管成像对DNA损伤影响的研究目的:利用免疫荧光显微镜和流式细胞仪评价冠状动脉CT成像(coronary CT angiography,CCTA)管电压对外周血淋巴细胞DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)水平的影响。材料与方法:本研究共纳入240例行CCTA检查的患者,随机分为A(A1、A2)、B(B1、B2)、C(C1、C2)和D(D1、D2)四个大组,共计八个亚组;每个大组60人,每个亚组30人。四个大组的患者接受不同管电压(120kV,100kV,80kV及70kV)的CCTA扫描。除管电压外,其他扫描条件保持一致;其中同一大组内两个亚组人群的人口学特征(年龄、性别、身高、体重、体质量指数[bodymass index,BMI])均无统计学差异(所有P>0.05)。所有纳入患者的BMI≤25Kg/m2。所有纳入患者均在检查前及检查后20分钟分别抽外周静脉血2ml。通过密度梯度离心法分离淋巴细胞后,A1、B1、C1及D1组患者的淋巴细胞进行γ-H2AX抗体免疫荧光染色,利用免疫荧光显微镜分析外周血淋巴细胞内的γ-H2AX荧光焦点的改变;A2、B2、C2及D2组患者的淋巴细胞样品经CD3抗体、γ-H2AX抗体孵育后,利用流式细胞仪检测检查前后CD3阳性T淋巴细胞中γ-H2AX蛋白的平均荧光强度(MFI,geometric mean of fluorescence intensity)。卡方检验用于组间、亚组间性别比较,独立样本t检验及单因素方差分析用于组间及亚组间人群年龄、身高、体重、BMI及有效剂量的比较,Wilcoxon符号秩和检验方法用于检查后与检查前γ-H2AX焦点及MFI改变情况的比较;Kruskal-Wallis秩和检验用于组间γ-H2AX焦点及MFI增加量的比较。P<0.05时算作统计学意义。结果:A1和A2、B1和B2、C1和C2及D1和D2组间人口学特征及辐射剂量无显著性差异(所有P>0.05)。经CCTA检查后,A1、B1、C1、D1组外周血淋巴细胞中γ-H2AX荧光焦点分别增加0.14、0.09、0.07、0.06焦点/细胞(所有P<0.05)。A2、B2、C2、D2组CD3阳性T淋巴细胞γ-H2AX的MFI分别增加21.26、9.13、8.10、7.13(所有 P<0.05)。A1、B1、C1、D1 组间及 A2、B2、C2、D2 组间 DNA损伤水平分别比较,随着管电压的降低,淋巴细胞γ-H2AX荧光焦点及CD3阳性T淋巴细胞γ-H2AX平均荧光强度的增加量均随之下降,其中A1(120kV)组的γ-H2AX荧光焦点增加量与三组均具有显著性差异(所有P<0.05)),但B1、C1、D1三组间无统计学意义(所有P>0.05),流式细胞术测得的CD3阳性T淋巴细胞γ-H2AX平均荧光强度的改变与之相同。结论:管电压由120kV降低至100kV,80kV或70kV,DNA损伤的程度均有显著下降,但管电压由100kV进一步降低,DNA损伤程度无明显下降。