【摘 要】
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目的:宫腔粘连是指由于子宫内膜损伤导致宫腔部分或完全闭塞。通过手术去除粘连组织并加以屏障是临床上的常规治疗方法,但存在预后不佳,复发率高的问题。近年来,干细胞移植治疗宫腔粘连的研究取得了突破性进展。经血干细胞是一种来源于女性月经血的成体干细胞,我们的前期研究证明自体经血干细胞移植能够改善重度宫腔粘连患者子宫内膜损伤,但治疗过程中移植细胞利用率低的问题有待解决。部分研究显示,通过三维细胞支架呈递细胞
【基金项目】
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国家自然科学基金（82071601）； 辽宁省中央引导地方科技发展专项项目（2020JH6/1050006）； 辽宁省科技计划项目（2018010222）； 中国医科大学重大专项建设计划（3110118033）； 盛京自由研究者基金；
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目的:宫腔粘连是指由于子宫内膜损伤导致宫腔部分或完全闭塞。通过手术去除粘连组织并加以屏障是临床上的常规治疗方法,但存在预后不佳,复发率高的问题。近年来,干细胞移植治疗宫腔粘连的研究取得了突破性进展。经血干细胞是一种来源于女性月经血的成体干细胞,我们的前期研究证明自体经血干细胞移植能够改善重度宫腔粘连患者子宫内膜损伤,但治疗过程中移植细胞利用率低的问题有待解决。部分研究显示,通过三维细胞支架呈递细胞能显著提高细胞种植率,延长细胞体内存活时间,发挥其治疗作用。RGD凝胶支架是一种人工合成的可调谐水凝胶,生物相容性良好,能够为细胞生存提供适宜的微环境。本实验拟使用雌激素-RGD凝胶支架包封经血干细胞,以宫腔灌注的方式植入大鼠子宫内膜损伤模型,预防其宫腔粘连,并观察经血干细胞对大鼠子宫内膜损伤的治疗作用,探索其治疗机制。方法:体外实验,应用活细胞染色、细胞计数、乙酰胆碱酯酶活力检测、免疫荧光等技术明确雌激素-RGD凝胶培养体系的制备条件,及其与经血干细胞的生物相容性。体内实验,通过机械刮宫建立大鼠子宫内膜损伤模型,使用经血干细胞联合雌激素-RGD凝胶支架移植治疗,并于治疗后18天取材,通过组织切片染色、免疫荧光、Realtime-PCR等技术评估联合移植对大鼠模型受损子宫内膜的治疗效果。结果:1.经血干细胞能够粘附于RGD凝胶支架并维持细胞活性;雌激素能够促进经血干细胞的增殖（P=0.0140）,提高其分泌能力（P=0.0326）,并促进经血干细胞向子宫内膜上皮细胞分化。2.经血干细胞联合RGD凝胶宫内灌注能改善细胞在子宫中的定植情况,限制经血干细胞全身迁移。3.经血干细胞联合雌激素-RGD凝胶支架移植能够显著提高子宫内膜损伤大鼠子宫内膜厚度及子宫内膜腺体数量,降低子宫内膜纤维化面积,上调子宫内膜角蛋白和增殖细胞核抗原的表达。4.经血干细胞联合雌激素-RGD凝胶支架移植后子宫内膜组织中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α表达量显著降低。结论:1.雌激素-RGD凝胶体系能够为经血干细胞生存提供适宜的微环境。2.经血干细胞联合RGD凝胶宫内灌注能够提高经血干细胞在子宫组织的局部作用效率。3.经血干细胞联合雌激素-RGD凝胶支架移植能够促进大鼠内膜细胞增殖,促进腺体再生,降低子宫内膜纤维化程度,恢复宫腔形态,并预防宫腔粘连。4.经血干细胞联合雌激素-RGD凝胶支架移植通过改善子宫内膜炎症反应,促进子宫内膜修复。
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