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芍药苷-6’-O-苯磺酸盐（代码:CP-25）是由芍药苷（Paeoniflorin,Pae）进行酯化形成的一种新型酯类衍生物。与芍药苷相比,CP-25的脂溶性,生物利用度和生物活性均显著升高。口服给药后,CP-25在大鼠体内具有分布良好、清除率低、平均滞留时间长、适度的生物利用度等特点。CP-25对胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis,CIA）和佐剂性关节炎（Adjuvant arthritis,AA）动物模型具有显著的治疗效果,并且对大鼠成纤维样滑膜细胞（Fibroblast-like synoviocytes,FLS）异常增殖和迁移具有抑制作用。因此,CP-25是一个潜在的抗炎和免疫调节药物。来氟米特（Leflunomide,LEF）是一个改善病情的抗风湿病药物（Disease modifying antirheumatic drug,DMARD）,用于治疗自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、银屑病、系统性红斑狼疮和结节病。尽管LEF疗效确切,但在使用中可能会涉及血液、肝脏、免疫系统和皮肤系统的严重不良反应。LEF是一种前药,口服LEF迅速转化为其活性代谢物特立氟胺（Teriflunomide,TER）,TER已被批准用于治疗多发性硬化症,和LEF一样,能够抑制二氢乳清酸脱氢酶和嘧啶的合成,TER的药代动力学不受食物、年龄、性别的影响。前期研究显示CP-25与LEF合用用于治疗AA大鼠能够起到增加疗效和减轻肝毒性的作用,但是其机制尚未阐明。本研究将从药代动力学的角度探索CP-25与LEF产生协同作用的机制。目的:1.研究CP-25对LEF在大鼠体内药动学、组织分布和排泄的影响。2.考察CP-25对大鼠外周血单个核细胞（PBMCs）吸收TER的影响。方法:建立超高效液相色谱质谱联用仪测定TER（LEF的活性代谢物）水平的方法,并对其选择性、定量下限、线性、精密度和准确度、回收率和基质效应、稳定性等进行方法学验证。采用该方法测定对照组[LEF（10 mg/kg）]和联合组[CP-25（50 mg/kg×7d）+LEF（10 mg/kg）]大鼠血浆、尿液、粪便、胆汁、心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、滑膜组织和PBMCs中TER的浓度。结果:1.生物样品的内源性物质均不干扰样品的测定,与TER和IS达到良好的基线分离。TER在大鼠血浆、尿液、粪便、胆汁及组织分析中的保留时间为0.5 min左右,IS为0.40 min左右。药物峰和内标峰附近未见杂质峰干扰,生物样品中内源性物质均不干扰体内的含量测定。定量下限的浓度由信噪比10:1确定。分别考察5个不同来源的LLOQ样品（血浆、尿液、粪便、胆汁、心、肝、脾、肺、肾、脑、小肠、滑膜、PBMC）的RSD和RE,其RSD和RE均在±20%以内,满足生物样品检测条件的要求。以样品浓度为横坐标,TER的峰面积与IS的峰面积的比值为纵坐标进行线性回归得标准曲线方程,其r~2均大于0.999,符合生物样本检测要求。考察QC样品日内及日间精密度和准确度。用RSD表示精密度,用测得的浓度与加入的浓度之间的RE表示准确度。QC样品的RSD和RE均在±15%以内,符合生物样品检测条件的要求。TER在大鼠不同生物样本中的回收率和基质效应在85%-115%之间,且QC样品的RSD在±15%以内,符合样品分析方法检测条件的要求。TER的QC样品在不同条件下的稳定性RSD和RE均在±15%以内,符合样品分析方法检测条件的要求。2.对照组与联合组LEF活性代谢物TER的平均血浆药物浓度-时间分布曲线结果显示LEF与CP-25合用后TER在大鼠体内消除加快。与对照组相比,联合组TER的AUC、Tmax、MRT、T1/2α、T1/2β下降（P<0.05）,CL升高（P<0.01）,提示CP-25能够促进LEF在大鼠体内的排泄或代谢。3.与对照组相比,联合组大鼠在0-6h,6-12h,12-18h,18-24h,24-36h,36-48h五个时间段内尿液中TER的排泄均显著性增加。在48h内,联合组尿液中累计TER排泄量约为对照组的2.4倍。与对照组相比,联合组大鼠在0-6h,6-12h,12-24h三个时间段内粪便中TER的排泄显著性增加。在48h内,联合组粪便中累计TER排泄量约为对照组的2.5倍。与对照组相比,联合组大鼠在0-4h,12-18h两个时间段内胆汁中TER的排泄显著性增加。在24h内,联合组胆汁中累计TER排泄量约为对照组的1.7倍。4.CP-25与LEF联合给药后能够降低心、脾、肺、肠中的TER在2h和9h的分布,在24h无影响;CP-25能够降低TER在肝脏2h、9h和24h的分布;CP-25能够降低肾脏和大脑中的TER在2h和9h的分布,但在2h的分布无统计学意义,这可能是因为个体差异大所致;CP-25能够升高TER在滑膜9h和24h的分布。5.CP-25和LEF联合给药可显著提高PBMCs摄取TER的能力,增加TER在体内或体外PBMCs中的含量。结论:口服CP-25联合LEF可促进TER的排泄,减少TER在大部分组织器官中的含量,尤其是在肝脏中的暴露量,这是解释CP-25减轻LEF引起的肝脏损伤的原因之一。CP-25也增加了TER在滑膜中的暴露量和PBMCs中的吸收量,这可以解释CP-25与LEF的协同作用。