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荞麦蜂花粉是蜜蜂从荞麦花药中采集花粉经过储存和发酵形成的花粉团。荞麦蜂花粉富含多糖、蛋白质、维生素及矿物质等营养成分,具有保健养生、软化血管、降血压血脂等作用,是典型的具有活性功能作用的药食同源食物。多糖是荞麦蜂花粉主要的生理活性成分之一,但目前有关荞麦蜂花粉多糖的结构特征、体外酵解及对肠道微生态的作用尚不清楚。本论文以荞麦蜂花粉为原料,首先从中提取多糖,之后对多糖分离纯化,对其理化性质、结构特性进行分析表征;其次,通过建立肠道菌群体外发酵模型,研究了荞麦蜂花粉多糖对人体粪便微生物菌群代谢产物的影响;最后,采用灌胃小鼠抗生素建立小鼠肠道菌群失调模型,探究荞麦蜂花粉多糖对肠道菌群失调小鼠微生态恢复和肠道屏障修复的作用,为荞麦蜂花粉的开发应用奠定理论基础,主要研究结果如下;1.以荞麦蜂花粉为原料,采用水提醇沉法提取粗多糖。采用木瓜蛋白酶-Sevag法、DEAE-52纤维素柱层析法对多糖进行分离纯化。通过紫外光谱、气相色谱、高效液相色谱及红外光谱等技术对多糖结构组成进行分析。结果表明:荞麦蜂花粉多糖经柱层析分离得到三种多糖组份即WFPP-N、WFPP-1、WFPP-2,紫外光谱分析三个组份多糖均不含有蛋白、核酸等杂质;荞麦蜂花粉多糖主要由阿拉伯糖(Ara)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、鼠李糖(Rha)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)组成,不同组份中各单糖摩尔比不同;WFPP-N、WFPP-1分子量测定分别为1.96×104 Da、2.24×104Da,WFPP-2中含有两个多糖组份其分子量分别为2.40×104 Da、4.38×103 Da;红外光谱表明三种多糖组份均具有多糖的特征吸收峰。2.通过建立肠道菌群体外发酵模型,对发酵液中pH值、总糖含量、NH3-N含量及短链脂肪酸含量进行测定,对荞麦蜂花粉多糖(WFPP)体外酵解规律进行分析,进而探究荞麦蜂花粉多糖对人体肠道菌群的有益作用。随着发酵时间的延长,发酵液中pH值和总糖含量不断降低。在发酵24h后,荞麦蜂花粉多糖高剂量组(WFPPH)组pH值由7.26降低至4.64,多糖组总糖消耗量均达80%以上;添加WFPP能明显减少培养液中NH3-N的积累,且添加量越高效果越明显;乙酸、丙酸、正丁酸是发酵液中主要的短链脂肪酸(SCFAs),在发酵过程中其含量都显著增加,各组发酵产物中短链脂肪酸含量从高到低依次为荞麦蜂花粉高剂量组(WFPPH组)、荞麦蜂花粉中剂量组(WFPPM组)、荞麦蜂花粉低剂量组(WFPPL组)。3.以Balb-c小鼠为动物模型,给小鼠灌胃250mg/kg/BW的头孢曲松钠建立小鼠肠道微生态失调模型,采用低(100mg/kg/bw)、中(200mg/kg/bw)、高(400mg/kg/bw)剂量的荞麦蜂花粉多糖灌胃小鼠,基于高通量测序技术发现,多糖组中OUT、Chaol、Ace指数和Shannon指数增加,Simpson指数降低,其中WFPPL组与自然恢复组(NR组)变化相似,而WFPPM组和WFPIPH组中相关指数基本能恢复到空白组(C组)水平。通过菌群组成柱状图分析,在门、科分类学水平上,不同剂量的荞麦蜂花粉多糖均能改变肠道菌群构成,有利于肠道常驻菌的恢复,抑制由于肠道失调导致大量繁殖的条件致病菌。通过对PCA、PCoA和NMDS统计方法图进行分析,WFPPL组在整体上对小鼠肠道失调恢复作用与NR相似,干预作用不明显。而WFPPM、WFPPH组与C组相近,中、高剂量多糖对肠道菌群的重塑作用较好,其中高剂量的效果最明显。通过组间样品LEfSe图分析,灌胃不同剂量的荞麦蜂花粉多糖均能影响在菌群结构变化中具有显著作用的菌种。4.荞麦蜂花粉多糖干预后,肠道微生态失调小鼠进食量、体重、胸腺指数和脾脏指数均增加,外周血液中LPS含量减少,同时通过对结肠进行HE染色和AB-PAS染色,发现荞麦蜂花粉多糖中、高剂量组小鼠结肠粘膜趋于正常,炎症细胞浸润基本消失,隐窝结构基本恢复正常,绒毛长度增加与正常对照组长度相似,杯状细胞数量增加。对肠黏膜中SIgA进行测定,发现高剂量组中SIgA显著增加。对肠黏膜中TNF-α、1L-6、1L-1β促炎因子进行分析,发现不同剂量多糖组中TNF-α、1L-6、1L-1β含量均显著降低,表明荞麦蜂花粉多糖可抑制促炎因子TNF-α、1L-6、1L-1β的释放,有效减轻肠道菌群失调引起的炎症反应。