【摘 要】
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外泌体miRNAs是重要的和可靠的生物标志物,可用于肿瘤的早期筛查和诊断。目前,外泌体miRNA的主要检测方法是定量逆转录PCR,但该方法操作复杂、耗时长且难以实现床旁检测,故其实用性受到了极大的限制。因此,发展一种灵敏、快速、简便的外泌体miRNAs检测新方法仍是亟待解决的难题。本研究提出了基于MOF@Pt@MOF纳米酶结合级联引物交换反应（PER）的超灵敏电化学策略用于外泌体miRNA检测。P
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外泌体miRNAs是重要的和可靠的生物标志物,可用于肿瘤的早期筛查和诊断。目前,外泌体miRNA的主要检测方法是定量逆转录PCR,但该方法操作复杂、耗时长且难以实现床旁检测,故其实用性受到了极大的限制。因此,发展一种灵敏、快速、简便的外泌体miRNAs检测新方法仍是亟待解决的难题。本研究提出了基于MOF@Pt@MOF纳米酶结合级联引物交换反应（PER）的超灵敏电化学策略用于外泌体miRNA检测。PER仅包含引物和门控发夹,由靶目标触发并在DNA聚合酶的作用下便可以自主和等温的方式产生一条具有重复序列域的长单链。紧接着,新生的长单链阻断保护链B,从而暴露捕获探针上纳米酶探针的结合位点,导致多层纳米酶与电化学传感界面结合。多层纳米酶是由双层Fe-MIL-88以及包裹在两层Fe-MIL-88之间的Pt NPs组成,对分解过氧化氢（H2O2）展现卓越的过氧化物酶样催化活性。通过多层纳米酶的催化,H2O2被分解为H2O和O2,并产生显著放大的电化学信号。受益于多层纳米酶优越的催化活性优势以及PER的双重扩增,实现了对外泌体miRNA-21超灵敏检测,动态线性范围为1 f M到1 n M,最低检测限低至0.29 f M,并且具有较高的特异性,可以区分仅具有单个碱基错配的同源miRNA。所建立的生物传感策略通过检测外泌体miRNA-21来区分乳腺癌肿瘤细胞和乳腺癌患者,其结果与qRT-PCR一致。因此,该电化学策略在肿瘤的早期诊断中具有广阔的应用潜力与价值。
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