肺腺癌的CT表现与lncRNA表达谱分析及靶lncRNA对肺癌细胞功能的影响

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目的:利用基因芯片技术,筛选出肺腺癌特征性lncRNA,确立靶lncRNA,为肺腺癌新型分子标志物开发和分子靶向治疗研究提供一些信息。我们进行了两方面的研究。第一部分:肺腺癌CT表现及其lncRNA表达谱分析;第二部分:初步探讨下调肺腺癌细胞中LINC00460的表达对细胞功能的影响。第一部分:肺腺癌的CT表现及lncRNA表达谱分析方法:1.收集2016年02月至2017年12月上海交通大学医学院附属第九人民医院(北院)32例肺腺癌患者的临床资料,均经手术病理证实。2.分析32例病人的CT影像学表现。3.随机选取其中4例无吸烟史患者配对的癌组织及癌旁非肿瘤组织标本,提取RNA,行lncRNA芯片检测。4.对配对的肺腺癌组织、癌旁非肿瘤组织及A549和H1299细胞株,通过qRT-PCR验证其中lncRNA的表达水平,通过特征对比分析,确定靶lncRNA行细胞功能实验。结果:1.肺腺癌CT的影像学征象:分叶征、毛刺征、胸膜牵拉征、血管集束征、瘤-肺界面清晰有助于肺腺癌的诊断。2.与癌旁非肿瘤组织比较,肺腺癌中异常表达的lncRNA共57个,其中表达上调27个,表达下调30个。3.经qRT-PCR验证,组织中及A549和H1299细胞株中lncRNA的表达水平,与芯片测序结果是一致的。4.在肺腺癌组织及细胞株中,LINC00460表达水平均显著升高(P<0.05)。第二部分下调肺腺癌细胞中LINC00460的表达对细胞功能的影响方法:1.制备和包装下调LINC00460表达的重组慢病毒,感染对数期生长的肺腺癌细胞系A549和H1299,建立LINC00460下调表达的肺腺癌细胞株。2.设立两组:实验组(LINC00460慢病毒感染组)、NT组(lncRNA-NT空白对照组)。3.药敏实验检测其对化疗药物的敏感性。4.Transwell小室实验、划痕实验检测两组细胞侵袭迁移能力。结果:1.制备重组慢病毒si LINC00460和空白对照组NT。经qRT-PCR验证,实验组si LINC00460较对照组表达水平显著下调(P<0.05)。2.药敏实验:在A549细胞中,实验组细胞较空白对照组无明显差异(P>0.05)。3.Transwell小室迁移实验:在A549和H1299细胞株中,实验组与空白组相比,穿膜细胞数减少,有统计学意义(P<0.05)。4.划痕实验显示在A549和H1299细胞中,实验组细胞较对照组,划痕愈合速度下降,有统计学意义(P<0.05)。结论:肺腺癌CT影像表现:分叶征、毛刺征、胸膜牵拉征、血管集束征、瘤-肺界面清晰是肺腺癌的重要征象。体外下调肺腺癌细胞中的靶lncRNA表达可降低细胞侵袭迁移能力。靶lncRNA发挥促癌作用,有望成为肺腺癌治疗新的靶点。
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