番茄叶色突变体资源创制及基因定位

来源 :华东师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:calvin0932
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叶片是高等植物进行光合作用的主要器官,叶色形成及变异既与植株生长发育、激素水平、环境响应等因素密切相关,又因其观赏经济价值成为园艺育种过程中具有重要应用潜力的目标材料。在拟南芥中,基于大量叶色变异突变体资源展开了广泛的叶色变异分子机制解析,包括:探究质体基因功能、解析质-核互作机制、开展植物生长发育、生理代谢、抗病响应的研究等。受困于叶色突变体资源的缺乏,在作为重要蔬菜作物及发育模式植物的番茄中,叶色突变形成的机制研究及其在品质、产量、抗性等方面的育种应用还远远落后。因此,通过构建番茄突变体库筛选叶色突变相关的优质资源、克隆新的番茄叶色相关基因并明确其功能,对番茄发育、抗性机制研究及未来推进番茄新品种、新资源的高效创制具有重要的现实意义。在本研究中,课题组利用具有植株矮小、生命周期短、转基因效率高等优势的“Micro-Tom”番茄为遗传背景,通过EMS诱变4.3万粒M0代种子构建获得了一个高密度番茄突变体库,并在此基础上加代筛选获得了12个M3代稳定遗传的番茄叶色突变体材料。获得的主要研究结果如下:1)通过对筛选到的12个叶色突变体材料在不同生长发育时期、生理表型、抗病特性等鉴定发现,本研究中突变获得的番茄叶色突变体材料除了光合色素含量及光合效率降低、叶绿体结构发生变异外,在种子早期萌发、植株形态建成、株高/节间距、开花坐果、果实转色进程、果实颜色、果实可溶性糖含量、灰霉菌真菌抗性等方面发生了广泛的遗传表型变异。2)基于表型鉴定的结果,本课题在叶色变异突变体群体中选择了具有灰霉菌抗性增强的突变体18M3-327以及果实发育进程中提前破色的18M3-494株系,通过高密度杂交F2代遗传群体的构建及分离,确定了18M3-327、18M3-494株系中控制叶色变异发生的基因属于单基因隐性遗传。随后,通过群体分离分析法(BSA)结合高通量测序及分析,筛选并鉴定了两株系中控制叶色变异发生的单核苷酸多态性位点(SNP)。最后,结合一代测序及定量表达实验结果,最终在18M3-327株系筛选出了5个、18M3-494株系筛选出了5个控制叶色变异发生的候选基因。综上所述,本文通过构建“Micro-Tom”番茄EMS诱变番茄突变体库,筛选并鉴定了具有广泛遗传变异表型的叶色变异突变体,极大丰富了目前番茄叶色突变体的遗传资源,为将来番茄叶色突变体的机制研究及应用提供了重要的资源基础。此外,在表型鉴定结果的基础之上,通过对产生叶色变异的基因的克隆及功能分析,为未来进一步解析番茄中叶色变异与生长发育、免疫响应、品质改良等机制的研究及遗传改良工作提供参考。
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