番茄EMS突变体库的构建及叶色黄化突变体的分析

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番茄(Solanum lycopersicum)作为目前世界上栽培面积最大、产量最高的蔬菜,既是人们生活中必不可少的新鲜蔬菜,也是重要的食品加工原料。在植物研究中,番茄作为重要的模式植物,在植物科学研究中也具有重要地位。突变体是新品种选育和研究功能基因组学良好的试材,而目前番茄的突变体库还相对较少。因此,本论文以测序番茄品种’Heinz 1706’为试材,采用不同EMS诱变剂处理番茄种子,在后代筛选各种变异植株,获得稳定变异株系,旨在建立番茄EMS突变体库,并对一个叶色黄化的突变株系进行了分析。论文的主要研究结果如下:1.以番茄’Heinz 1706’种子为试材,采用不同浓度EMS(0.30%、0.5%、0.70%、0.9%、1.0%、1.3%、1.5%、2.0%)诱变剂处理8h和12h,结果表明,随着EMS诱变浓度的升高与处理时间的延长,种子发芽率逐渐降低。高浓度处理显著降低了植株的结实率,影响了植株正常的生长发育。从植株突变率与生长发育状况综合考虑,最终确定了适宜的处理方法为1%浓度的EMS诱变种子12h.2.通过统计M2群体7864个单株的生长发育特性,获得了 553株变异单株,得到了 1160个叶形态、叶色、花形态、果实大小、株型等变异性状。总的单株变异数为7.00%,其中324株是有多个变异表型,229株只有单一变异表型。叶、花、果实、植株的表型变异株数分别为375、183、196和460,变异频率分别是4.77%、2.33%、2.49%、5.85%。对变异植株进行留种,初步构建了番茄’Heinz 1706’的EMS突变体库。3.从M2代群体中获得一个编号为55的叶色黄化突变体(Y55),在整个植物生长期间表现出明显的黄色叶表型,其生长势比野生型要弱,但能正常开花结实;测定Y55突变体叶片的色素及其前体含量,结果表明Y55的叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素、总叶绿素含量以及叶绿素a/b比值均显著低于野生型,同时,Y55叶绿素合成的前体物质含量均较野生型显著降低,由此表明Y55叶绿素含量的下降可能也是由于整个叶绿素生物合成途径的合成能力下降造成的;根据扫描电镜和透射电镜的观察,发现Y55叶片下表皮保卫细胞面积、气孔面积及茸毛数均显著低于野生型,叶绿体发育结构受损;对Y55叶片光合和荧光参数分析表明,Y55光合作用显著降低,光合效率及耐光抑制能力均低于野生型;遗传分析表明该黄叶表型由单个隐形基因控制。综上,本论文筛选建立了测序番茄品种’Heinz 1706’EMS诱变的处理体系,初步建立了突变体库,并对叶色黄化突变体Y55初步形态结构、生理参数和叶色性状遗传规律进行分析,为进一步研究相关基因功能奠定了坚实的基础。
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