褶纹冠蚌血细胞及其免疫特性研究

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为了了解褶纹冠蚌血细胞形态特征及其分类,利用四种方法,即活体细胞观察技术、Wrights染色技术、电子显微镜技术和流式细胞术,对褶纹冠蚌血细胞形态特征进行研究。综合四种方法观察结果分析得出,褶纹冠蚌血细胞可根据细胞质内颗粒的有无,分为颗粒细胞和无颗粒细胞两大类,颗粒细胞的胞质内含有许多细胞质颗粒,而无颗粒细胞的胞质内不含或含有少量的细胞质颗粒。颗粒细胞又可根据细胞的大小和颗粒的大小,将其分为大颗粒细胞和小颗粒细胞两种,无颗粒细胞也可根据细胞的大小和核质比的差异,将其分为透明细胞和淋巴样细胞两种。体长18-25cm的褶纹冠蚌血细胞浓度为(2.37±0.51)×10~6个/ml。大颗粒细胞,胞质内有许多电子密度高的大颗粒,细胞直径较大,为13.18±1.20μm,核直径为4.63±0.55μm,核质比较低,为0.35±0.03。经Wrights染色后,大颗粒细胞为嗜酸性。此类细胞数量较少,约为(4.47±0.12)%。小颗粒细胞,胞质内含有许多电子密度高的小颗粒,细胞易伸出伪足,细胞直径为9.11±1.11μm,核直径为3.58±1.11μm,核质比较低,为0.39±0.09。经Wrights染色后,小颗粒细胞有嗜酸性和嗜碱性两种。此类细胞数量较多,约占总血细胞数的(56.50±1.41)%。透明细胞,胞质内没有或有少量颗粒,细胞易伸出伪足,细胞直径为7.56±0.77μm,核直径为3.53±0.57μm,核质比较高,为0.47±0.08。经Wrights染色后,透明细胞有嗜酸性和嗜碱性两种,此类细胞数量较多,约占总血细胞数的(35.80±2.11)%。淋巴样细胞,细胞直径为4.68±0.43μm,核直径为3.73±0.05μm,核质比非常高,为0.80±0.07。经Wrights染色后,淋巴样细胞为嗜碱性。此类细胞数量最少,约为(2.96±0.23)%。观察鳃、外套膜、足、水管、肝、肾、心脏和雌雄生殖腺组织的石蜡切片发现,不同的组织中,血细胞的分布情况也是不尽相同。大颗粒细胞、小颗粒细胞和透明细胞是各组织常见的细胞类群,而淋巴样细胞在各组织中难于观察到。水温对褶纹冠蚌血细胞的含量有明显的影响作用。15℃前,血细胞含量随着温度的上升而有所下降,血细胞含量的最低值在15℃,为(1.9±0.59)×10~6/ml;15℃后,随温度的升高,血细胞含量又逐渐的升高,30℃时血细胞含量达到最高值,为(2.62±0.6)×10~6/ml。小颗粒细胞和透明细胞含量随温度的变化规律与血细胞含量的变化规律是一致的,而大颗粒细胞和淋巴样细胞含量随温度的变化规律与血细胞数量的变化规律有所不同。褶纹冠蚌血细胞体外吞噬酵母菌和枯草芽孢杆菌实验结果发现,四种血细胞都有体外吞噬细菌的能力。小颗粒细胞吞噬能力最强,其次是大颗粒细胞,再次是透明细胞,最弱的是淋巴样细胞。吞噬实验分别在10℃、20℃、30℃和37℃下进行,结果发现,随温度的升高,血细胞的吞噬率和吞噬指数都随之升高,当温度达到30℃时,吞噬率和吞噬指数都达到最大值,当温度继续升高,血细胞的吞噬率和吞噬指数开始下降,37℃时达到最小值。电镜发现,各种血细胞吞噬的细菌数也不近相同;血细胞吞噬细菌后,可以观察到次级溶酶体和消化残体。蚌螨卵刺激下褶纹冠蚌包囊的形成实验发现;在蚌螨卵的周围形成了一个圆形或卵圆形的包囊。包囊周围观察到大量血细胞的聚集,主要是大颗粒细胞和小颗粒细胞,血细胞扁平化,伪足伸长,相互连接。电镜观察发现,有包囊的组织都发生了病理变化,组织细胞受到蚌螨卵的严重挤压,血细胞扁平化,伪足多而长。大颗粒细胞向包囊边缘释放大颗粒。通过褶纹冠蚌的鳃、外套膜、水管、足和唇瓣等五个组织切片,发现各组织都有蚌螨卵的寄生。五种组织中蚌螨卵总数进行G-检验(G=160.8975>χ~20.001=11.345,df=4 P<0.01),结果发现蚌螨卵在五种蚌组织上的分布具有显著差异性。
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