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本试验以奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus ♀×Oreochromis aureus ♂)为研究对象,通过饲养试验和肝细胞离体培养试验,拟从整体及细胞水平探讨肌肽、肌肽锌对奥尼罗非鱼抗氧化及促生长作用,为开发肌肽、肌肽锌作为绿色水产饲料添加剂提供理论依据。
选取奥尼罗非鱼630尾,随机分为7组:对照组、50mg/kg肌肽组、100mg/kg肌肽组、200mg/kg肌肽组、50mg/kg肌肽锌组、100mg/kg肌肽锌组、200mg/kg肌肽锌组,每组三个重复,每个重复30尾鱼,试验期60d。于试验20d、40d、60d时,称重及测量体全长,采集血清、背肌样品。测定生长指标:相对体重生长率(RSGR)、相对体长生长率(RLGR);血清指标:葡萄糖、尿素氮(BuN)、生长激素(GH)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)、三碘甲状腺原氨酸(T<,3>)、四碘甲状腺原氨酸(T<,4>);肌肉指标:总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总超氧化物歧化酶(1-SOD)活力、丙二醛(MDA)。
在肝细胞离体培养中,肌肽组在完全培养液中添加1.5mmol/L肌肽。肌肽组、对照组接种后不再更换培养液,连续培养8d,每天观察肝细胞形态,并测定两组培养液中·OH、O<,2>·<->、MDA水平。
试验结果如下:
1.从整个试验期看,在基础饲料中添加肌肽能够提高肌肉T-AOC、T-SOD和GSH-Px活力,降低MDA含量。20d时,50mg/kg、100mg/kg肌肽组肌肉T-SOD活力显著高于对照组(P<0.05),40d时,各剂量肌肽组肌肉GSH-Px活力均显著高于对照组(P<0.05),表明肌肽能够提高鱼体肌肉抗氧化能力。
2.在离体培养肝细胞试验中,在营养缺乏条件下,15mmol/L肌肽利于维持细胞完整形态,降低了培养液中OH水平,特别是在1d、2d、6d、7d时效果显著(P<0.05),降低了培养液中O<,2><->·丙二醛水平。表明肌肽能够提高肝细胞抗氧化能力。
3.从整个试验期看,50mg/kg肌肽降低了血糖水平,提高了血清GH、IGF-Ⅰ含量,并对T<,3>、T<,4>分泌造成影响,与对照组相比,提高了RSGR 71.68%(P<0.05)、RLGR144.01%(P<0.05)。表明50mg/kg肌肽能够促进奥尼罗非鱼生长。
4.从整个试验期看,肌肽锌提高了肌肉T-AOC,200mg/kg肌肽锌效果显著(P<0.05),提高了肌肉T-SOD、GSH-Px活力,但也提高了肌肉MDA水平。
5.肌肽锌降低了血清BUN含量,提高了血清T<,4>水平,与对照组相比,200mg/kg肌肽锌提高了RSGR 35.39%(P>0.05),提高RLGR 43.85%(P>50.05)。表明,200mg/kg肌肽锌利于促进奥尼罗非鱼生长。以上结果提示:在饲料中添加适宜剂量肌肽、肌肽锌,可能通过提高鱼体抗氧化水平和血清中相关激素的分泌,而对奥尼罗非鱼生长有促进作用,其中以50mg/kg肌肽作用明显。