免疫组化和扫描电镜研究成牙本质细胞突

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目的:该实验应用免疫酶组化染色技术,对人恒牙成牙本质细胞突内的波形蛋白进行定位研究.利用扫描电镜研究成牙本质细胞突,旨在研究成牙本质细胞突在牙本质小管中的分布.探讨不同的准备方法对扫描电镜结果的影响.为牙痛和牙本质敏感症的发病机制提供理论基础.材料和方法:将牙齿拔除后立即切成薄片,100ml/L中性福尔马林液固定72小时,1 00ml/L硝酸脱钙.石蜡包埋,制取6 μ m厚的组织切片.采用SP法进行免疫组化染色.将牙齿拔除后立即被四种方法其中的一种处理.(1)牙齿被液氮劈开后固定,梯度酒精脱水,临界点干燥机(CPD)干燥.(2)牙齿拔除后用凿子劈裂后固定.梯度酒精脱水,临界点干燥机干燥.(3)牙齿拔除后用切割片把根部切除,在喷水涡轮机上磨成颊舌向2-3mm的薄片后固定.梯度酒精脱水,临界点干燥机干燥.(4)牙齿拔除后用切割片把根部切除,固定后冠部用液氮劈开,梯度酒精脱水,冷冻干燥机(FD)干燥.喷金,扫描电镜观察.结果:阳性染色的波形蛋白结构在牙本质小管内2/3呈连续较直的长条状,外1/3有弯曲.在冠部至釉牙本质界,在根部达牙本质小管末端.其分布趋势是从牙本质内层到外层逐渐减少,阳性表达程度逐渐减弱.扫描电镜观察,用方法(2)、(3)和(4)准备的所有标本成牙本质细胞突只延伸到牙本质小管的内1/3.用方法(1)处理过的标本的成牙本质细胞突达釉牙本质界.结论:(1)成牙本质细胞突贯穿牙本质全层达牙本质小管末端.(2)不同的准备方法对扫描电镜的结果有影响.
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