研究背景:角膜在正常生理状态下是一个完全无血管的组织,角膜通过复杂的血管生成机制和抗血管生成机制的平衡来保持角膜的无血管性[1]。但是在创伤、感染、炎症、角膜缘干细胞屏障破坏、缺血缺氧等原因影响下,血管生成机制占据主导地位,引起角膜新生血管（corneal neovascularization,CNV）的产生。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是参与CNV生长的一个重要细胞因子,参与了CNV生长的多个阶段。通过抗VEGF治疗可抑制CNV生成。KH902是新一代的抗VEGF药物,本研究主要是通过使用不同浓度的KH902眼用注射液,观察各浓度的药物对兔碱烧伤后的CNV的抑制作用。方法:1、建立动物模型及分组:取成年新西兰兔48只,雌雄比例为1:1,均取其左眼制作兔碱烧伤模型,并随机分为4组,使用KH902眼用注射剂（Conbercept）配置不同浓度的KH902,A组2.5mg/m L,B组5mg/m L,C组10mg/m L,D组为对照组（生理盐水）,均为碱烧伤模型建立后立即开始点眼,每次点药量为50μl,每日3次进行点眼。2、分别在制模后7、14、28d拍摄兔眼的前节照片,观察每组兔眼的CNV生长情况,并测算CNV面积。3、在制模后7、14、28d,各组取兔眼角膜作病理检查,观察HE染色后的角膜组织形态;同时用免疫组化方法进行VEGF表达的测定,并进行VEGF定量分析;4、分别在制模后3d、7d、14d、28d进行角膜激光共焦显微镜检查,记录每个时间点每组角膜各层组织的清晰照片,观察各组角膜组织的改变,以及各组中央区CNV生长情况和炎性细胞浸润程度,同时记录治疗后7、14、28d四组产生中央区CNV和角膜溃疡的眼数;5、选取清晰照片,利用共焦显微镜自带的细胞计数软件,进行炎性细胞密度测算。6、各组数据的统计学分析采用重复测量方差分析,任意两组间的数据比较采用SN K-q检验。统计学差异以P<0.05为标准。结果:1.形态学改变:制模后7d,四组周边均有少量CNV长入,D组最明显;制模后14d,C组少量CNV长入,A、B组出现大量向心性生长的CNV,部分侵犯中央区。D组血管粗大密集,6眼出现溃疡,2眼发生穿孔,A组4眼出现浅溃疡,B、C组均无溃疡产生。制模后28d,四组CNV形成,其中D组CNV明显,D组角膜溃疡有8眼,3眼发生穿孔,A组5眼出现浅溃疡。2.HE染色:对各组HE染色切片进行观察发现,四组均出现了角膜上皮及基质细胞的损失和修复、炎性细胞的浸润和CNV的生长。但D组的炎性细胞较密集,CNV管径和面积较高。3.VEGF表达:在制模后7、14、28d,A、B、C组较D组VEGF表达明显减少;A、B、C三组进行组间比较,仅制模后28d时B、C组间无统计学差异（P>0.05）,其余差异均有统计学意义（P<0.01）;4.CNV面积:制模后7、14、28d,A、B、C三组较D组CNV面积减少,有统计学差异（P<0.01）,而三组组间无统计学差异（P>0.05）;5.共焦显微镜:制模后3d,四组角膜上皮缺失,上皮至基质水肿,中央区基质层未见炎性细胞及免疫细胞浸润,未见CNV形成;制模后7d,四组基质层水肿仍明显,可见炎性细胞的少量浸润,三个治疗组浸润较少。四组周边基质层均见CNV长入,但D组血管管径较粗,分支较多。四组角膜中央区均未见明显CNV;制模后14d,四组水肿减轻,基质纤维排列仍混乱,四组CNV明显,三个治疗组的部分眼和D组12眼可见中央区CNV,D组血管密度高,三个治疗组之间血管形态无明显差异。四组炎性细胞的浸润增多,D组更明显。A组4眼浅溃疡,D组6眼出现溃疡。制模后28d,基质层瘢痕出现,炎性细胞浸润减少,三个治疗组仅部分兔眼产生中央区CNV,血管少且稀疏,D组血管粗大且密集。6.炎性细胞计数:制模后7d,四组间无统计学差异（P>0.05）;制模后14d,三个治疗组与对照组有统计学差异（P<0.001）,治疗组间也存在统计学差异（P<0.01）;制模后28d,三个治疗组与D组有统计学差异（P<0.01）,治疗组间无统计学差异（P>0.05）。结论:不同浓度的KH902对兔碱烧伤后的角膜新生血管均有抑制作用,低浓度的KH902即可产生明显的抑制作用。