【摘 要】
：
背景尽管手术、放化疗和介入治疗等对肝癌具有明显治疗效果,但病人的生存期并未显著延长,单一的治疗手段,并不能达到良好的治疗效果,因此,探索更为安全高效的肝癌综合治疗方法具有极其重要的临床意义。而利用纳米载体的多功能化,有望实现肝癌化疗、免疫治疗等综合治疗目的。我们制备表面耦联特异性抗体的精胺普鲁兰多糖-PLGA-CD3纳米粒（PS-PLGA-CD3 NPs）,进而修饰Fe3O4,制备磁性纳米粒MNP
论文部分内容阅读
背景尽管手术、放化疗和介入治疗等对肝癌具有明显治疗效果,但病人的生存期并未显著延长,单一的治疗手段,并不能达到良好的治疗效果,因此,探索更为安全高效的肝癌综合治疗方法具有极其重要的临床意义。而利用纳米载体的多功能化,有望实现肝癌化疗、免疫治疗等综合治疗目的。我们制备表面耦联特异性抗体的精胺普鲁兰多糖-PLGA-CD3纳米粒（PS-PLGA-CD3 NPs）,进而修饰Fe3O4,制备磁性纳米粒MNPs,以构建多功能的纳米治疗体系,考察其在肝癌的化疗/免疫治疗/磁靶向新型联合治疗方面的可行性。目的1.合成精胺普鲁兰-乳酸-羟基乙酸共聚物的聚合物PS-PLGA,并制备表面耦联CD3抗体纳米粒PS-PLGA-CD3 NPs,阐明其对T细胞活力、细胞因子分泌及摄取效应的影响;2.探索PS-PLGA-CD3修饰Fe3O4的磁性纳米粒（MNPs）,与T细胞孵育后构建趋磁性T细胞的可行性,初步研究趋磁性T细胞的体内外趋磁靶向作用。方法1.PS-PLGA-CD3 NPs的制备及理化性质表征。合成聚合物PS-PLGA,傅里叶近红外光谱、核磁共振氢谱仪对其结构进行表征;超声透析法制备PS-PLGA NPs,表面耦联CD3抗体制备PS-PLGA-CD3 NPs。透射电镜、纳米粒径和Zeta电位分析仪分别检测PS-PLGA NPs和PS-PLGA-CD3 NPs形态学特征;并采用荧光定量分析法检测其表面耦联CD3抗体含量。2.CCK-8法检测两种纳米粒（PS-PLGA NPs、PS-PLGA-CD3 NPs）对体外T细胞和Hep G2细胞活力的影响;通过小鼠溶血实验和急毒实验评价PS-PLGA-CD3NPs毒性作用。3.ELISA试剂盒测定PS-PLGA-CD3 NPs对T细胞分泌γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子β（TNF-β）的影响;高内涵细胞成像仪与流式细胞仪分别检测T细胞和Hep G2细胞对纳米粒的摄取情况。4.PS-PLGA-CD3 NPs修饰Fe3O4纳米粒制备修饰型磁性纳米粒（MNPs）,孵育法构建趋磁性T细胞;MTT法考察MNPs对T细胞活力的影响;ELISA试剂盒测定MNPs对T细分泌IFN-γ、IL-2、TNF-β的影响;流式细胞仪检测T细胞对MNPs的摄取情况;在磁场作用下,分别通过高内涵细胞成像仪和小动物光声活体成像仪,检测趋磁性T细胞的体内外趋磁性能。结果1.红外光谱和核磁共振氢谱证实成功合成PS-PLGA。PS-PLGA NPs和PS-PLGA-CD3 NPs形态均呈规整球形,粒径均一,粒径分别为121.9±20.3 nm和174.3±27.5 nm。精胺取代度为9.7%的PS-PLGA-CD3 NPs的抗体含量是52.1±9.4μg/mg。2.当浓度在1～200μg/m L之间时,PS-PLGA NPs体外对T细胞的细胞活力无显著影响,而PS-PLGA-CD3 NPs能够显著增强T细胞的细胞活力,并且随纳米粒浓度增加,细胞活力增强作用越明显。PS-PLGA NPs和PS-PLGA-CD3 NPs在浓度范围为5～1000μg/m L对Hep G2细胞的细胞活力均无显著影响;溶血结果显示,PS-PLGA-CD3 NPs无溶血作用;急毒试验结果表明,与对照组相比,在体重、摄食量及主要脏器病理切片均无明显差别。3.T细胞和Hep G2细胞均能有效地摄取PS-PLGA-CD3 NPs。与未耦联抗体组相比较,同一浓度的PS-PLGA-CD3 NPs显著促进T细胞分泌IFN-γ、IL-2、TNF-β这三种细胞因子。4.一定浓度范围MNPs能被T细胞摄取并增强T细胞的细胞活力;显著促进T细胞分泌IFN-γ、IL-2、TNF-β这三种细胞因子;在磁场作用下,趋磁性T细胞在体内外均表现出一定趋磁性能。结论1.成功制备了形态圆整的PS-PLGA-CD3 NPs和MNPs,在一定浓度范围内无明显细胞毒性,且能有效增强T细胞的细胞活力并分泌细胞因子。2.PS-PLGA-CD3 NPs和MNPs能够被T细胞高效摄取,构建的趋磁性T细胞,在体内外均表现出一定趋磁性。3.本研究成功制备了一种能够有效增强T细胞活力的耦联特异性抗体的纳米粒PS-PLGA-CD3 NPs和MNPs,有望成为用于肝癌治疗的新型化疗/免疫治疗/磁靶向多功能纳米体系。
其他文献
基于司法实践的需要,近几年,全国许多地方法院都出台了关于民事调查令的规范性文件,开始试行民事调查令,其目的在于解决民事诉讼中当事人及其代理人基于客观情况而自身无法获取诉讼需要的有关证据,由法院赋予当事人或其代理律师持令向被调查主体调取证据。试行民事调查令,是为了保障当事人诉讼权利,强化律师依法调查收集证据的作用,且有利于缓解人案矛盾、提升诉讼效率、优化民事诉讼结构。但是在分析讨论之后,无论是在理论
个人所得税费用扣除制度一直是我国个税改革过程中的焦点。从1980年至2018年9月,我国共进行六次个人所得税改革,并五次调整基本减除费用,且每次均在不同程度上提高了免征额额度。但从整体改革过程来看,费用扣除范围包括基本减除费用与三险一金,只考虑了纳税人基本生活保障的问题,未充分考虑纳税人个体责任与义务、生活负担的差异性,即所有人适用统一的费用扣除标准,忽略了纳税人民生负担的差异性,如教育费用、医疗
上世纪飞速发展的制造业为中国经济发展贡献了巨大的作用,然而随着世界经济格局的转变,仅仅依靠要素取胜的制造业失去了曾经的风采,制造业企业能否实现转型升级实现产品和技术的更新换代则成为了制造业企业能否再次焕发生机的重要转折。国家为了推动企业的创新研发活动也推行了一系列的财税政策,而固定资产加速折旧政策也是其中较为重要的一项。当企业采用加速折旧政策对其固定资产进行折旧时,可以在固定资产购置的初期提取较多
全球气候变暖和二氧化碳排放问题持续引发热议,中国作为世界上最大的发展中国家,也是能源消耗大国和C02排放大国之一,自然环境污染问题日渐严峻且突出。工业作为能源消耗和碳排放的主要贡献者,也是国家节能减排的重点,而汽车工业是我国得重点工业产业,汽车不仅在使用时会产生大量的碳排放,在整车和零部件制造过程中也会产生大量二氧化碳。碳税是控制二氧化碳排放最有效的经济手段之一,为了更好地控制汽车工业碳排放,完成
中国的股票市场发展已经有近30年的历程,但与西方世界美国等发达经济体的股票市场相比,中国的股票资本市场还有较多不完善的地方,所以科学的判断中国股票市场发展的未来趋势是急需解决的问题。目前股票预测的几类方法大致可以分为三类,一类是统计时间序列方法,考虑金融数据的时序性特征,利用ARMA模型、ARIMA模型和GARCH模型等时间序列模型不断地创新改革,此类模型对短期市场预测效果不错,但长期期市场预测效
特质波动率近些年来是国内外学术领域研究的一个热点。按照Sharpe（1964）,Lintner（1965）等传统的金融学理论,特质风险由于可以被分散化,因而不会带来相应的风险收益,即股票的特质风险应该与收益率无关。Merton（1987）认为由于信息不完全,投资者难以充分分散风险,因而高特质波动率的股票应该给投资者更高的回报率作为补偿。但是,Ang,Hodrick,Xing等（2006）却发现拥有
中国教育发展改革开放以来,教育制度持续改善,教育资金大幅增加,教育资源持续丰富。第十九届中国共产党全国大会指出,教育全面发展,中西部和地方教育明显加强[1]。不难发现,我国的教育发展突飞猛进。为改善贫困地区的教育条件,我国教育部门开展了一系列工作。随着教育的改革与发展,我国农村地区的教育受到了社会的重视。因此,农村居民在教育方面的消费比也发生了变化。随着我国教育成本分担制度的确立和完善,教育支出成
《基于语料库的英语教学方法》是一本有关语料库与英语教学的论文集。自二十世纪八十年代以来,语料库语言学和语言教学一直备受关注。随着技术与教育理念的发展,语料库及其工具的应用也在不断推陈出新。本书介绍了语料库在英语教学中的具体应用,不仅讨论了教学与语料库相结合的可能性和潜力,而且探讨了教学实践中利用语料库来解决实际问题的方法。本次翻译采用了纽马克的文本类型理论。纽马克认为译者需要根据原文本的类型选择翻
青藏高原拉萨地体经历了中生代安第斯型造山和新生代的碰撞造山作用。相对于岩浆岩来说,拉萨地体东南部冈底斯弧出露了的、代表岩浆弧中-下地壳组成的中、高级变质岩研究较少。本文对冈底斯弧东端的变泥质片岩进行了岩石学、相平衡模拟和年代学研究。研究表明,变泥质片岩由黑云母、白云母、石榴石、矽线石、斜长石、石英、少量的钛铁矿、金红石组成,含或不含蓝晶石,可识别出三期变质作用,早期矿物组合为石榴石+黑云母+斜长石