【摘 要】
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目的:SHC SH2结构域结合蛋白1（SHC SH2-domin binding protein1,SHCBP1）是一种新型的有丝分裂调节因子,其在胃癌发生发展中的作用机制尚未阐明,本研究旨在探究SHCBP1能否参与调控胃癌细胞有丝分裂及其潜在作用机制。方法:通过蛋白免疫印迹实验（Western blot,WB）、免疫荧光实验探究SHCBP1在胃癌细胞有丝分裂过程中的表达以及敲减胃癌细胞中SHCB
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目的:SHC SH2结构域结合蛋白1（SHC SH2-domin binding protein1,SHCBP1）是一种新型的有丝分裂调节因子,其在胃癌发生发展中的作用机制尚未阐明,本研究旨在探究SHCBP1能否参与调控胃癌细胞有丝分裂及其潜在作用机制。方法:通过蛋白免疫印迹实验（Western blot,WB）、免疫荧光实验探究SHCBP1在胃癌细胞有丝分裂过程中的表达以及敲减胃癌细胞中SHCBP1对有丝分裂的影响。利用免疫荧光染色及活细胞成像技术探究SHCBP1在有丝分裂不同时期的定位及敲减SHCBP1对纺锤体形态的影响。最后构建稳定表达GFP-SHCBP1融合蛋白的胃癌细胞系探究SHCBP1在胃癌细胞有丝分裂的动态定位情况。结果:将细胞周期同步化后通过Western blot以及免疫荧光实验发现SHCBP1在有丝分裂期显著高表达。流式细胞检测发现敲减胃癌细胞SHCBP1基因引起G2/M期细胞阻滞。纺锤体免疫荧光染色及活细胞成像检测发现,SHCBP1在分裂中期定位于纺锤体,末期定位于胞质分裂环。敲减SHCBP1会抑制细胞分裂,并形成多极和异形纺锤体。最后,利用GFP-SHCBP1融合蛋白高内涵检测发现SHCBP1在有丝分裂中的动态定位,SHCBP1在有丝分裂结束后可定位于点状细胞器,免疫荧光染色发现其定位的点状细胞器为中间体残余体。结论:SHCBP1通过参与纺锤体、中间体及中间体残余体的形成调控有丝分裂进而促进胃癌生长,值得进一步深入研究。
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