【摘 要】
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目的:探讨黄腐酚（Xanthohumol）对人皮肤鳞癌细胞A431细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响和作用机制。方法:给予不同浓度梯度的黄腐酚（0、20、40、60、80、100μmol/L）分别处理A431细胞24 h、48 h和72 h,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测A431细胞增殖活性;利用细胞划痕实验、Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验检测黄腐酚处理后A43
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目的:探讨黄腐酚（Xanthohumol）对人皮肤鳞癌细胞A431细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响和作用机制。方法:给予不同浓度梯度的黄腐酚（0、20、40、60、80、100μmol/L）分别处理A431细胞24 h、48 h和72 h,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测A431细胞增殖活性;利用细胞划痕实验、Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验检测黄腐酚处理后A431细胞的迁移能力和侵袭能力;利用荧光染色实验检测黄腐酚处理后A431细胞的凋亡与坏死情况;利用MDC染色实验检测黄腐酚处理后A431的自噬情况;用β-半乳糖染色试剂盒检测黄腐酚处理后A431细胞的自噬情况;利用Western Blot检测A431细胞中JAK2、STAT3、Bcl-2、Bax、Caspase 9和Caspase 3蛋白的表达;利用分子对接软件预测黄腐酚与PELP1的结合能力;利用瞬时转染si RNA-PELP1的方法将下调A431细胞中PELP1蛋白的表达,随后利用Western Blot检测A431细胞中PELP1、SRC和STAT 3蛋白的表达。结果:通过MTT实验发现,与空白对照组相比,经不同浓度的黄腐酚处理后,A431细胞增殖活力受到抑制,且随着浓度和时间的延长抑制率也随之上升,具有剂量时间依赖性;细胞划痕实验发现,随着药物浓度的加大,A431伤口愈合面积不断减少;Transwell迁移和侵袭实验发现,经不同浓度的黄腐酚处理后,随着药物浓度的加大,A431细胞纵向迁移和侵袭细胞数量不断减少;荧光结果显示,经不同浓度的黄腐酚处理后,随着药物浓度的加大,A431细胞凋亡与坏死的细胞不断增多;MDC染色与β-半乳糖试剂盒仍然色结果显示,经不同浓度的黄腐酚处理后,随着药物浓度的加大,A431细胞未呈现自噬与衰老特征;WB实验发现经不同浓度的黄腐酚处理后,随着药物浓度的加大,A431细胞中JAK2、STAT3和Bcl-2有下调趋势,而Bax、Caspase 9和Casepase 3具有上调趋势;分子对接实验发现,黄腐酚可以与PELP1蛋白进行结合;转染si RNA-PELP1后的WB实验发现,A431细胞中PELP1、SRC、STAT3均具有下调趋势。结论:黄腐酚可呈剂量依赖性的抑制A431细胞的增殖、侵袭、横向及纵向迁移,并可以通过调控JAK2、STAT3、Bcl-2、Bax、Caspase 9和Caspase 3蛋白促进A431细胞的凋亡;分子对接实验发现黄腐酚可与PELP1进行结合;利用si RNA-PELP1下调PELP1的表达同样可以下调SRC、STAT3蛋白的表达,我们推测黄腐酚可能可以通过调控PELP1下调SRC、STAT3通路促进A431细胞的凋亡。
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