睡菜提取物对失眠大鼠镇静催眠作用的研究

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目的:本实验采用腹腔注射PCPA建立大鼠失眠模型,观察大鼠的行为学、下丘脑的病理变化及下丘脑和海马神经递质的含量变化等来综合评价睡菜提取物对大鼠失眠模型的治疗作用及机制,为进一步开发和利用睡菜资源提供依据。方法:选取SPF级SD雄性大鼠48只,随机分为6组:空白组(CON,n=8)、睡眠剥夺模型组(SDM,n=8)、艾司唑仑组(EST,n=8)、睡菜低剂量组(LMT,n=8)、睡菜中剂量组(MMT,n=8)、睡菜高剂量组(HMT,n=8),除了CON组,其余各组大鼠腹腔注射PCPA混悬液(350 mg/kg)建立大鼠失眠模型,连续给药2天。于第三天,采用灌胃给药的方式,EST组给予艾司唑仑0.2 mg/kg,LMT组、MMT组、HMT组分别给予睡菜提取物200、400、800mg/kg,CON组和SDM组分别给予等体积的生理盐水,连续给药7天。观察并记录各组大鼠的一般行为情况、造模前后和治疗后的各组大鼠体重变化及各组大鼠睡眠情况;通过旷场实验和翻正实验比较各组给药后的差异;借用H&E染色的方法,观察大鼠下丘脑的病理变化情况;应用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法测定下丘脑、海马不同脑区5-HT、GABA、GLU、DA神经递质的含量。结果:(1)各给药组体重均明显升高,睡菜中、高剂量组体重升高最显著。(2)旷场实验中,睡菜低、中、高剂量组总运动距离均明显增加、粪便颗粒数均明显减少,睡菜中、高剂量组中央区域停留时间均明显减少;模型组在各个区域均有活动轨迹,且活动频繁,经药物治疗后,活动轨迹相对模型组稀疏。(3)翻正实验中,睡菜低、中、高剂量组睡眠潜伏期均明显缩短、睡眠持续时间均明显增加;(4)H&E染色,空白组可见散在的神经细胞胞核固缩深染,模型组可见多量的神经细胞胞核固缩深染,各给药组固缩的神经细胞数量相对减少;(4)在下丘脑中,睡菜高剂量组5-HT、GABA的含量均显著增加,睡菜低、中、高剂量组GLU、DA的含量均显著降低、GLU/GABA比值均显著下降;在海马中,睡菜低、中、高剂量组5-HT、GABA的含量均显著增加、GLU和DA的含量显著降低、GLU/GABA显著下降。结论:(1)睡菜提取物可以改善PCPA致失眠大鼠的睡眠情况,具有一定的镇静催眠作用。(2)睡菜提取物镇静催眠的作用机制,可能与调节下丘脑和海马中5-HT、GABA、GLU、DA等神经递质有关。
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