本研究通过2个试验制备了抗孕马血清促性腺激素多克隆抗体(以下简称抗eCG多抗)并研究了eCG多抗免疫检测试剂盒。试验一通过选择标准抗原、免疫兔子及对多抗进行提纯及性质鉴定，制备出特异性较强的抗eCG多抗，从而为ELISA检测提供条件。用辣根过氧化物酶标记制备的抗eCG多抗，并对直接竞争法和间接竞争法两种检测方法进行了初步比较，确定后者为试剂盒方法，从而为试剂盒制作奠定基础；试验二对选定的试剂盒检测方法进行检测条件的优化，组装出eCG多抗免疫检测试剂盒，并对其检测结果进行评价。 试验结果表明，美国Sigma公司产的eCG纯度较高，制备的抗eCG多抗效价也较高，达10<5>以上，蛋白含量为23.67 mg/ml，纯化后效价接近4×10<4>，蛋白含量为8.088 mg/ml，蛋白质回收率为47.85％。与促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)进行交义反应鉴定，发现其与LH有微弱交叉，而与FSH无交叉反应，考虑到LH在体内的含量及其微弱，故该多抗可用来做免疫检测使用。选择了间接竞争法做为试剂盒的检测方法。试剂盒检测程序为：用标准抗原液(eCG+CBS(碳酸盐缓冲液，0.05mol/l，pH 9.6))进行包被，包被条件为37℃孵育3h：PBST(PBS(磷酸盐缓冲液)+吐温20)洗涤后用0.5％的明胶进行封闭，封闭条件为37℃孵育2h；PBST洗涤后加入样品液和一抗，样品液为血清样品+PBS(0.01mol/l，pH 7.4)，一抗为1000倍稀释的抗eCG多抗，37℃孵育1.5h；；PBST洗涤后加入二抗(羊抗兔)37℃孵育1h；PBST及双蒸水洗涤后加入底物液，37℃避光反应10min，加入终止液(2M H<,2>SO<,4>)终止反应，在450 nm波长下，用酶标仪读数。组装的试剂盒检测样品效果良好，其检测范围为2.5-20 IU/ml，灵敏度为2.8 IU/ml，板内和板间变异系数分别为7.2％和14.2％。方法的线性关系良好(R<2>=0.9828)。因此，本研究组装的试剂盒可以用来检测妊娠马血清及eCG制剂。与常规的生物学方法相比，该法省时省力且经济，准确度也高。