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结核病（Tuberculosis,TB）是由结核分枝杆菌引起的慢性传染性疾病,随着多药耐药结核菌株的出现及继发性免疫缺陷患者的增多,结核病的发病率在全球呈上升趋势[1]。利福喷丁（Rifapentine,RPT）是脂溶性长效利福霉素类抗生素,其体外抗结核杆菌作用比利福平强2-10倍,尤其对生长期内的结核分枝杆菌杀菌作用更强[2]。但利福喷丁难溶于水,对光敏感,稳定性差,且目前临床上多为口服的RPT胶囊,该剂型首过消除大、生物利用度低,使其临床应用受到一定的限制[3]。为了克服这些问题,临床现开始采用纤支镜给药的方式进行肺结核的治疗,然而目前面临的新问题是没有适合的制剂使其达到更好的治疗作用。因此,亟待开发一种稳定性强、留滞性好、能够自身降解,且生物利用度高的缓释抗结核药物系统。本研究将利福喷丁制成脂微球温敏凝胶的形式,筛选出最优处方和最佳制备工艺,并对其理化性质和安全性进行评价,为结核病的治疗提供一种新的给药剂型。第一部分处方前研究目的:建立利福喷丁含量测定方法,测定利福喷丁的油水分配系数,并测定其在不同油相中的平衡溶解度。方法:采用高效液相色谱法（HPLC）测定利福喷丁的含量,并对其线性、专属性、精密度、稳定性、回收率等进行考察。通过摇瓶法测定利福喷丁的油水分配系数,采用平衡溶解度法测定利福喷丁在各油相中的溶解度,并筛选出适宜的油相。结果:建立了HPLC测定利福喷丁含量的方法,线性、专属性、精密度、稳定性和回收率均符合方法学测定的要求。利福喷丁的油水分配系数为1.98,脂溶性较强。初步筛选出了对利福喷丁溶解性较高的油相。结论:本部分采用的HPLC测定利福喷丁含量的方法符合试验要求,可用于利福喷丁含量测定。且利福喷丁的油水分配系数适宜,为后期的处方设计和工艺研究奠定了基础。第二部分利福喷丁脂微球制备及理化性质考察目的:确定利福喷丁脂微球（Rifapentine Lipid Microsphere,RPT-LM）的最佳处方和制备工艺,并对其理化性质进行考察。方法:以脂微球外观和稳定性为脂微球质量的评价指标,采用单因素考察对各组分用量进行筛选,以粒径和离心稳定常数值（Ke）为评价指标,采用正交试验筛选脂微球的最优处方,并对其最佳制备工艺进行筛选。对RPT-LM的最优处方和制备工艺进行理化性质考察。结果:RPT-LM的最优处方为:RPT 0.05 g、玉米油1.0 g、大豆磷脂0.9 g、甘油0.25 g、油酸0.05 g,维生素E 0.5 g,加蒸馏水至10 m L。最佳制备工艺为:制备温度80℃、剪切时间11 min、剪切速度11000 r/min。RPT-LM外观呈橙色不透明状,无分层,表面无油滴,粒径为482.4 nm,PDI为0.264,包封率为55.51±0.50%,含量为4.93±0.02 mg/m L。结论:本部分成功地制备了RPT-LM,该制剂具有良好的稳定性,并且提高了利福喷丁的溶解度。第三部分利福喷丁脂微球温敏凝胶的制备及理化性质研究目的:确定利福喷丁脂微球温敏凝胶（Rifapentine Lipid Microsphere Temperature-Sensitive-Gel,RPT-LM-TSG）的制备方法,并对其理化性质及体外释药行为进行评价。方法:采用聚（DL-乳酸羟基乙酸-聚乙二醇）共聚物（PLGA-PEG-PLGA）为温敏凝胶基质,以胶凝温度和胶凝时间为评价指标,筛选出RPT-LM-TSG的最优处方,并对其理化性质进行考察。采用透析袋法考察其体外释药行为。结果:确定了RPT-LM-TSG最优处方为:RPT-LM与浓度为20%的PLGA-PEG-PLGA溶液体积比为2:1。RPT-LM-TSG粒径为589.4 nm,PDI为0.142;胶凝温度为（34.47±0.15）℃,胶凝时间为（41.33±1.70）s,体外降解时间较长。体外释放30天时,累积释放率大于80%,且各时间点的药物释放浓度均高于最低抑菌浓度。体外释放行为符合Riger-Peppas动力学模型。结论:本部分成功制备了RPT-LM-TSG,胶凝温度和胶凝时间适宜,体外释放时间长,具有一定的缓释效果,符合本实验设计的目的。第四部分利福喷丁脂微球温敏凝胶的细胞水平及药效学评价目的:以RPT-LM-TSG为肺部给药制剂的细胞毒性及药效学评价。方法:采用MTT试验测定给药后A549细胞的存活率,考察该制剂在细胞水平的安全性。通过激光共聚焦显微镜观察细胞对Cou-6-LM的摄取情况。通过气管插管对SD大鼠给以RPT-LM-TSG,观察制剂在肺部的滞留情况,采用肺组织提取液抑菌试验考察制剂对病菌的抑制情况,对制剂的药效学进行评价。结果:空白凝胶基质对细胞毒性较小,可知该载体材料的安全性较高。在一定的浓度和时间范围内,A549细胞对药物的摄取随浓度的升高和时间的延长而增加。气管插管给药后,在大鼠的肺组织中可看到橙色的制剂滞留在肺部。含药肺组织对金黄色葡萄球菌和耻垢分枝杆菌都具有一定的抑制效果。结论:本部分试验表明所制备的PRT-LM-TSG毒性较小,能被A549细胞摄取,通过气管插管给药后,能够滞留在肺部。