牛疱疹病毒1型（Bovineherpesvirus 1,BoHV-1）给世界范围内的养牛业造成了巨大的经济损失。高迁移率族蛋白B1（Highmobilitygroupbox 1,HMGB1）是一种广泛存在的DNA结合蛋白,可被释放到细胞外,是一种强促炎细胞因子,在多种炎症性疾病的发病过程中发挥重要作用。然而,BoHV-1感染与HMGB1信号通路的相互作用尚未见报道。本研究发现,在牛肾细胞（Madin-Darbybovinekidneycells,MDBK）感染 BoHV-1后期显著增加HMGB1 mRNA的表达和蛋白的释放,然而HMGB1及其同源晚期糖基化终末产物受体（Receptor for advanced glycation endproducts,RAGE）的蛋白表达水平降低。病毒感染可促进HMGB1蛋白在细胞核和线粒体中的积累,通过共聚焦显微镜分析,发现细胞核HMGB1重新定位,且聚集形成典型的斑点。此外,在病毒感染细胞过程中,β-catenin的特异性抑制剂iCRT14能够促进HMGB1的转录和蛋白的释放,并调节HMGB1向线粒体和细胞核的易位。iCRT14处理后,在病毒感染的细胞中很容易观察到细胞凋亡,促进细胞凋亡可能是iCRT14促进病毒感染诱导HMGB1释放的分子机制之一。Glycyrrhizin是一种被广泛应用的HMGB1特异性抑制剂,本研究发现,Glycyrrhizin可干扰病毒感染诱导的HMGB1典型斑点的形成,并通过影响病毒基因转录,如病毒调节蛋白bICP0、bICP4、bICP22以及病毒糖蛋白gD等,一定程度上抑制病毒复制。本实验室前期研究报道,病毒感染后期激活Phospholipase C-γ1（PLC-γ1）信号可能与炎症反应有关,另外该病毒能通过表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor,EGFR）信号激活PLC-γ1信号。然而,在病毒感染过程中PLC-γ1如何被动员的机制尚不清楚。在本研究中,病毒感染后,PLC-γ1和β-catenin,以及p-PLC-γ1（S1248）和p-β-catenin（S552）之间的结合显著增强。在未受感染的细胞中,PLC-γ1的特异性抑制剂U73122,能够降低β-catenin蛋白表达,这表明PLC-γ1可调节β-catenin蛋白表达。此外,EGFR的特异性抑制剂Gefitinib可降低β-catenin的磷酸化和蛋白表达,这表明EGFR在调节β-catenin信号通路中起到重要作用。然而,在病毒感染的细胞中,均未观察到上述两种抑制剂相应的抑制作用,这表明感染期间产生的病毒产物可以绕开PLC-γ1和EGFR直接调节β-catenin。综上所述,BoHV-1感染对HMGB1蛋白的表达、亚细胞易位和释放有影响,这些影响可能是通过β-catenin信号通路调控的,这为β-catenin信号通路通过影响HMGB1信号通路调控炎症反应提供了一种新的机制。此外,研究首次发现BoHV-1感染的情况下,PLC-γ1和EGFR调控β-catenin,但是病毒感染可以绕开PLC-γ1和EGFR直接调节β-catenin,本研究增加了我们对于β-catenin调控炎性相关分子的认识。在细胞水平研究表明,HMGB1抑制剂Glycyrrhizin可抑制BoHV-1复制及HMGB1分泌,具有潜在的治疗价值,后续需进行体内实验进一步验证。β-catenin抑制剂iCRT14不能抑制HMGB1介导的炎症反应,鉴于β-catenin与HMGB1、PLC-γ1和EGFR均相互作用,其临床治疗价值仍然值得在动物水平上深入研究和评价。