奶牛乳腺炎是损害奶牛福利、影响食品安全和奶牛养殖效益的重要疾病之一。金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus,S.aureus）是奶牛乳腺炎的常见致病菌。高羊毛氨酸硒（Selenohomolanthionine,SeHLan）是一种新型有机硒,对其在病原微生物感染过程中的作用尚未报道。本试验通过添加不同剂量SeHLan,探究SeHLan在S.aureus诱导的乳腺炎中的作用机制,为SeHLan的生产应用提供理论和应用支持。选用24只Wistar大鼠,从配种后分别以缺硒、正常硒和富硒的剂量在饮水中添加SeHLan,并在分娩后4 d通过乳导管注射S.aureus或PBS。实验动物分组分别为:对照组（SeHLan添加量为0.15 mg/kg）,乳腺中注射PBS;试验组为缺硒组、正常硒组和富硒组,SeHLan添加量分别为0.03、0.15和1.5 mg/kg,并进行乳腺内注射S.aureus。感染12 h后,采集血液、乳腺和肝脏。检测血清硒浓度、乳腺中硒蛋白的基因表达、乳腺组织细菌载量、血常规、乳腺组织病理学、MPO活力以及乳腺、血清和肝脏中抗氧化酶活力及MDA的含量。并通过Western blot和荧光定量PCR检测乳腺中Nrf2信号通路基因和蛋白的表达,以及NF-κB与MAPK信号通路相关蛋白和炎症因子的表达。试验结果如下:（1）血清硒浓度和乳腺硒蛋白相关基因的变化:血清中硒浓度随着SeHLan的补饲显著或极显著增加（P<0.05或P<0.01）。S.aureus感染乳腺后,与对照组相比,正常硒组的乳腺中GPX1、GPX4和Sepp1的mRNA表达极显著降低（P<0.01）;GPX1和Sepp1的mRNA表达随着SeHLan的补饲显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01）。（2）乳腺细菌载量、血液白细胞数、乳腺病理组织学及MPO的变化:不同剂量的SeHLan对乳腺组织细菌载量无显著影响。S.aureus感染乳腺后,与对照组相比,正常硒组大鼠的血液白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞的数量极显著降低（P<0.01）,且均低于正常值,乳腺腺泡内中性粒细胞浸润增多,MPO活力显著升高（P<0.05）;与正常硒组相比,缺硒组的血液白细胞和中性粒细胞的数量显著降低（P<0.05）,淋巴细胞数降低,乳腺腺泡内中性粒细胞浸润增加,MPO活力极显著升高（P<0.01）;富硒组的淋巴细胞数显著升高（P<0.05）,白细胞数升高,趋近于正常范围,乳腺组织损伤减轻,中性粒细胞浸润减少,MPO活力降低,差异不显著。（3）乳腺、血清和肝脏中抗氧化酶活性的变化:Saureus感染乳腺后,与对照组相比,正常硒组的乳腺中T-AOC、GPX和SOD的活力显著升高（P<0.05）,而血清和肝脏中各指标变化差异不显著。与正常硒组相比,缺硒组的乳腺、血清和肝脏中T-AOC和GPX活力均显著或极显著降低（P<0.05或P<0.01）,且MDA升高;富硒组的乳腺、血清和肝脏中GPX和T-AOC活力显著升高（P<0.05或P<0.01）,MDA含量降低。（4）乳腺组织Nrf2信号通路相关基因和蛋白的变化:S.aureus感染乳腺后,与对照组相比,正常硒组的乳腺中Nrf2、HO-1和NQO1的基因和蛋白表达均显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01）,且Keap1和胞浆Nrf2蛋白表达极显著或显著降低（P<0.01或P<0.05）。与正常硒组相比,缺硒组的乳腺中Nrf2、HO-1和NQO1的基因和蛋白表达显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01）,且Keap1表达极显著降低（P<0.01）;富硒组的Nrf2、HO-1和NQO1的基因表达显著或极显著降低（P<0.05或P<0.01）,Nrf2和NQO-1蛋白表达也降低,差异不显著,Keap1基因和蛋白表达极显著降低（P<0.01）。（5）乳腺组织NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白表达及炎症因子mRNA的变化:S.aureus感染乳腺后,与对照组相比,正常硒组的乳腺中IκBα、p65、ERK、JNK和p38蛋白的磷酸化显著或者极显著升高（P<0.05或P<0.01）,且IL-1β、IL-6、CXCL1和TNF-α的mRNA表达极显著升高（P<0.01）。与正常硒组相比,缺硒组的乳腺IκBα、p65、ERK、JNK和p38蛋白的磷酸化水平显著或极显著升高（P<0.05或P<0.01）,炎症因子表达极显著升高（P<0.01）;富硒组的乳腺中p65、IκBα、p38、ERK和JNK蛋白的磷酸化被显著或者极显著抑制（P<0.05或P<0.01）,IL-1β、IL-6和CXCL1的mRNA表达极显著降低（P<0.01）。综上所述,在妊娠期补充SeHLan可减轻S.aureus感染引起乳腺组织损伤,降低氧化应激与炎症反应,而硒缺乏时,S.aureus感染后引起更严重的氧化应激与更强烈的炎症反应,乳腺组织损伤加剧,说明SeHLan能通过降低氧化应激与炎症反应,保护乳腺组织免受S.aureus感染损伤,且具有一定的剂量依赖性。