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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)患者的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)对T细胞的免疫调节作用受损，但其具体机制尚不清楚。白介素34（interleukin-34，IL-34）具有调节免疫系统的作用。在本研究中，旨在探讨IL-34对MSCs免疫调节功能的影响。 方法:(1)分离RA患者CD4+T细胞，加入anti-CD3/CD28抗体活化(anti-CD3抗体:3μg/ml;anti-CD28抗体:2μg/ml)，同时与IL-34刺激或未刺激的脐带MSCs(MSCs∶CD4+T细胞=1∶10)共培养72小时，收集悬浮细胞，采用流式细胞术检测CD4+CXCR5+ICOS+T细胞和Treg细胞百分率，采用RT-PCR方法检测CD4+T细胞中IL-21、Bcl-6mRNA表达水平，ELISA检测上清中PEDF蛋白水平，收集共培养体系中MSCs，采用RT-PCR检测MSCs中PEDF mRNA表达水平和CD4+T细胞中PEDF mRNA水平;(2)向上述共培养体系中加入anti-CSF-1R抗体，，收集悬浮细胞，采用流式细胞术检测CD4+CXCR5+ICOS+T细胞和Treg细胞百分率，采用RT-PCR方法检测CD4+T细胞中IL-21、Bcl-6mRNA表达水平，收集培养上清，ELISA检测上清中PEDF蛋白水平，收集共培养体系中MSCs，采用RT-PCR检测MSCs中PEDF mRNA表达水平;(3)流式检测MSCs上CSF-1R的表达，在IL-34刺激或不刺激的MSCs中加或不加anti-CSF-1R抗体，分别培养0h、24h、48h、72h，收集MSCs，采用RT-PCR检测MSCs中mRNA的表达水平，收集培养上清，采用ELISA检测PEDF蛋白水平;(4)向IL-34刺激或未刺激的MSCs和活化的CD4+T细胞共培养体系中加入empty pEX-4或PEDF-pEX-4质粒，培养72小时，收集悬浮细胞，采用流式细胞术检测CD4+CXCR5+ICOS+T细胞百分率，采用RT-PCR方法检测CD4+T细胞中IL-21、Bcl-6mRNA表达水平，收集细胞培养上清，采用ELISA检测PEDF蛋白水平，收集MSCs，采用RT-PCR检测MSCs中PEDF mRNA表达水平，采用qPCR检测MSCs中IL-10，IL-6，IDO，TGF-β，HGF和COX-2mRNA表达水平;(5)提取MSCs总蛋白，Western blot检测IL-34刺激前后和及加入IL-34受体拮抗剂后，细胞内Erk1/2、JNK、P38、NF-κB通路的活化，并用相应的信号通路抑制剂处理MSCs，加入IL-34刺激后ELISA检测培养上清中PEDF的水平。 结果:1，与IL-34未刺激的共培养组相比，IL-34刺激的共培养组中CD4+CXCR5+ICOS+T细胞百分率明显升高，Treg细胞百分率明显降低，同时，CD4+T细胞中IL-21and Bcl-6mRNA表达均显著升高，CSF-1R在MSC表面表达，加入anti-CSF-1R抗体可抑制共培养体系中CD4+CXCR5+ICOS+T细胞产生，促进Treg细胞产生，同时，CD4+T细胞中IL-21和Bcl-6mRNA表达均明显下降;2，RT-PCR和ELISA结果均显示，在上述共培养体系和MSCs单独培养体系中，IL-34可在mRNA水平和蛋白水平上抑制MSCs产生PEDF，且PEDF的降低具有一定的时间依赖性，而anti-CSF-1R抗体则可逆转该现象，IL-34刺激或未刺激的MSCs均不表达PEDF;3，流式结果显示，将PEDF-pEX-4转入MSCs中，使其PEDF表达升高，可使共培养体系中CD4+CXCR5+ICOS+T细胞百分率显著下降，CD4+T细胞IL-21和Bcl-6mRNA也明显下调，培养上清中PEDF蛋白水平和MSCs中PEDF mRNA均显著升高，同时MSCs中IL-6mRNA表达明显升高，而COX-2mRNA表达明显降低;4，与未加任何刺激剂的MSCs相比，IL-34刺激MSCs后p-P38，p-NF-κB和p-JNK的表达明显升高，p-ERK1/2的表达没有明显变化，当加入anti-CSF-1R抗体后，p-P38和p-NF-κB表达显著下降，ELISA结果显示，加入信号通路抑制剂检测IKK-16和SB203580后，上清中PEDF蛋白水平明显升高，但加入FR180204和SP600125，PEDF水平没有明显变化。 结论:IL-34刺激的MSCs通过激活P38/NF-κB信号通路分泌低水平的PEDF，导致MSCs IL-6mRNA表达升高，COX-2mRNA表达降低，进而异常调控RA外围血CD4+CXCR5+ICOS+T细胞。