用于DNA甲基化高灵敏检测的光波导生物传感器

来源 :中国科学技术大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ewen2005
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DNA甲基化,指的就是CpG岛中的一个胞嘧啶被修饰上一个甲基。特定基因启动子中的CpG岛中如果存在5-mC,则会破坏转录因子和其他调节蛋白与DNA之间的结合,从而导致稳定并且可遗传的转录沉默。由于对转录调控有重大影响,人类所形成的许多疾病(涵盖癌症在内)都与非正常的甲基化密切相关。关于肿瘤的所有程序,包括有:(1)形成、(2)确诊、(3)预后、(4)后续发展,都受到DNA甲基化的重大影响,因此,越来越多的科学家开始参与到DNA甲基化检测方法的研究之中。荧光的检测方法所具备的优势在于其一灵敏度高,其二操作便捷,因此被广泛地应用于生化分子的检测当中。然而,常规的荧光分子在生物体系中通常具有局限性,例如稳定性差、易受到体系中荧光背景信号地干扰等缺点,这限制了它们的实际应用。为此,我们课题组先前已经报道过了一种基于聚二乙炔微米管的方法,用于检测microRNA。但是,我们尚未对DNA的分析进行过探究。因此,以DNA为检测目标,我们设计了一种新型的基于聚二乙炔微米管检测平台。该平台集成了聚二乙炔微米管与金纳米棒之间的FRET效应和限制性内切酶对双链DNA的消化,为早期疾病筛查设备的制备带来了意义与价值。鉴于聚二乙炔微米管在制备成本昂贵、制备周期长等方面存在的不足,我们开发了一种荧光壳聚糖纤维材料,其可以代替聚二乙炔微米管作为检测平台,并将其与光波导系统对DNA甲基化进行检测。壳聚糖纤维由于具有一维波导结构,在波导体系中荧光的激发点和端头的出射点相距很远,互不干扰,因此大大避免了背景荧光信号的干扰。此外,鉴于Au@PDA微米管难以被长时间地保存在缓冲液中,我们还把三明治杂交结构引入到了壳聚糖纤维检测平台当中,实现了甲基化DNA的灵敏性检测。壳聚糖纤维光波导平台极有可能发展成为新型的癌症诊断方法,并且除了检测DNA,该方法还可以被扩展到更多的生物标志物的检测中(例如蛋白质、miRNA等)。
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