【摘 要】
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建立一种基于免疫磁珠、桥接DNA与实时荧光定量聚合酶链式反应技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)相结合的高灵敏、特异性检测沙丁胺醇(salbutamo
【机 构】
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河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄050018军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天津300050;军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天津,300050;河北科技
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建立一种基于免疫磁珠、桥接DNA与实时荧光定量聚合酶链式反应技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)相结合的高灵敏、特异性检测沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的方法,通过抗体特异性识别两个邻位连接探针,在桥接DNA的桥接作用下将两个邻位探针连接形成全长扩增子,以此为模板进行qPCR实现信号放大.结果表明,方法检测SAL的线性范围为1.0×10-2 ng/mL～1.0×103 ng/mL,检出限为1.2×10-2 ng/mL,测定自来水及人工尿液样品中SAL的加标回收率在87.1％～111.7％之间.通过免疫磁珠提高检测的效率,通过桥联DNA提高特异性,通过变温扩增提高检测方法的灵敏度以及适用性,搭建高特异性、通用的检测平台,实现对沙丁胺醇的高灵敏检测.
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