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为了深入了解高温地热环境中的微生物多样性,完善本实验室的免培养方法,从云南元江瓦纳高温热泉及盘龙江中先后采集到不同性质的13份样品,运用纯培养方法及荧光原位杂交方法(Fhlorescence In Situ Hybridization。FISH)对其中的嗜热菌多样性进行了比较研究。目的是较全面、充分、客观地认识微生物在自然环境中的天然存在状况,为微生物资源的开发和保护提供更多有用的信息。结果初步表明,所研究样品中均具有比较丰富的细菌多样性,相互之间存在差异。而且不同方法检测到的细菌多样性并不完全一致。
采用纯培养方法,分离纯化获得菌株124株,通过对其中13株菌16S rDNA片段对嗜热菌多样性进行了初步分析。结果显示:所有样品中都存在有丰富的细菌多样性;贫营养培养基(7#培养基)不能分离得到菌株;温度对群落中微生物的物种组成产生很大影响;样品中所获得大部分菌株容易死亡,并对其中4株菌进行了生理生化实验等,初步鉴定分别为Alicyclobacillus Getlomic speciesstrain FR6、Geobacillus uzenensis、Geobacillus thermoleovorans及Anoxybacillus ayderenSiS。
采用7种不同探针,应用荧光原位杂交方法(Fluorescence In SituHybridization,FISH)分析了元江瓦纳不同采集时间两批样品及盘龙江的嗜热菌多样性,并与纯培养方法进行了比较研究。结果显示:样品中都存在有丰富的细菌多样性,具有古菌、α蛋白菌、β蛋白菌、γ蛋白菌、CFB门中噬细胞菌属一产黄菌属族群及浮游生物及部分真核细菌的存在;有大量环境DNA无法以所采用探针探针确定其种群;新样品较原有样品多样性更高;但是由于EUB338探针设计缺陷,无法探测到细菌的存在。