单胺氧化酶抑制剂检测方法的建立及天然单胺氧化酶抑制剂的跟踪分离

来源 :兰州理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ladiylove
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研究表明:单胺氧化酶抑制剂(MAOIs)在治疗抑郁症,帕金森症,阿尔兹海默病方面具有确切的疗效,但目前上市的单胺氧化酶抑制剂具有较多的副作用,因此从天然资源中发现新的高活性,低毒性的单胺氧化酶抑制剂显得十分必要。为了高效的筛选出具有抑制单胺氧化酶(MAO)活性的化合物,本文对定性,定量检测MAOIs的方法进行了研究。在建立定性,定量检测方法后,本文对一种藏药萨折(Syzygium cumini)和一种植物圆锥山蚂蝗(Desmodium elegans)以及一种植物内生真菌(Talaromyces sp.)中的MAOIs进行了分离。具体研究结果如下:  (1)通过筛选新型底物的方法建立了一种完全不被抑制组与完全抑制组光密度差异大,操作性强,测定结果可靠,假阳性结果少的酶标法。  (2)以MTT为显色剂,酪胺为底物建立了一个试剂量少,背景颜色深,利于观察,实验时间短的检测MAOIs的TLC生物自显影方法。该方法为快速的发现天然单胺氧化酶抑制剂提供了捷径。  (3)从藏药萨折(Syzygium cumini,基源植物为海南蒲桃)酸性提取物中分离得到了3个化合物,它们鉴定为没食子酸(1)、没食子酸甲酯(2)、3,4,8,9,10-Pentahydroxydibenzo[b,d]pyran-6-one(3),上述3个化合物均表现出强的MAO抑制活性,其IC50分别为10μmol/L,35.9μmol/L,35.2μmol/L。  (4)从植物山蚂蝗(Desmodium elegans)生物碱提取物中分离得到了8个化合物,它们鉴定为(-)-丁香树脂醇(4)、3-(4-(1,3-羟基-1-(4-羟基-3-甲氧苯基)丙-2-基氧基)-3-甲氧苯基)丙酸乙酯(5)、4,4"-Dihydroxy-3,3,3,5-tetramethoxy-7,9,7,9-diepoxy-4,8-oxy-8,8-sesquineolignan-7",9"-diol(6)、4",4-Dihydroxy-3,3,3",3,5,5’-hexamethoxy-7,9:7,9-diepoxy-4,8":4,8-bisoxy-8,8-dineolignan-7",7,9",9-tetraol(7)、Desmodeleganine(8)、蟾酥碱(9)、蟾酥碱氮氧化物(10)、蟾毒色胺(11),其中,化合物8为一个新的吲哚类生物碱化合物。化合物8,9,10,11表现出强的 MAO抑制活性,IC50分别为13.9μmol/L,36.0μmol/L,50.0μmol/L,57.0μmol/L。运用分子对接实验,研究了化合物8与MAO-A及MAO-B的结合方式,结果表明,化合物8与MAO的活性口袋中的多种氨基酸残基有多种相互作用,显示了强的亲和性。  (5)从植物内生真菌Talaromyces sp. LGT-4中分离得到了6个化合物,它们鉴定为麦角甾醇(12)、Wortmannolone(13)、(2Z,4E)-5-(8-hydroxy-1,5-dimethyl-3-oxo-6-oxabicycl o[3.2.1]octan-8-yl)-3-methylpenta-2,4-dienoic acid(14)、Wortmannolol(15)、对羟基苯乙醇(16)、trans-6-Dodecene(17),其中,化合物15为一个新的呋喃甾体类化合物。化合物15表现出弱的MAO抑制活性。
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