Ubiquitin-specific protease11(USP11)具有半胱氨酸蛋白酶活性，是去泛素化酶家族重要成员之一。最新研究表明USP11能参与调控细胞内多种靶蛋白的功能和稳定性，包括病毒RNA复制蛋白、DNA修复蛋白、TGFβ和NF-κB信号通路相关蛋白等，在多种疾病的发生发展中起着关键作用。　　p21蛋白由CDKN1A基因编码，是第一个被明确的细胞周期依赖性激酶抑制子，属于CIP/KIP家族成员，参与介导细胞周期阻滞、DNA复制与修复、增殖与分化、衰老与凋亡等细胞生命活动。p21的表达和蛋白水平通过转录和转录后机制被严密调控。在转录水平，p21通常以p53依赖和非依赖的方式被调控。在蛋白水平，p21是一种稳定性不高的蛋白，半衰期仅有20-60分钟，主要通过泛素-蛋白酶体通路降解。虽然，研究表明细胞内多种蛋白能通过不同的机制稳定p21，但是这些蛋白都不具有去泛素化酶的活性和功能，在细胞内是否存在去泛素化酶能够直接逆转p21泛素化过程，进而稳定细胞内的p21蛋白至今仍然不清楚。　　本课题通过质谱发现去泛素化酶USP11和p21蛋白存在潜在的相互作用。进一步我们通过间接免疫荧光共定位、免疫共沉淀和GST pull-down等实验证明USP11和p21蛋白在细胞内存在直接的相互作用。USP11作为去泛素化酶，能够通过去泛素化作用在细胞内稳定多种蛋白，为了明确USP11是否介导细胞内p21的稳定，我们通过改变USP11的表达，荧光定量PCR，蛋白酶体阻断和新生蛋白抑制等实验，发现USP11在细胞内能够通过延长p21的半衰期而稳定p21，抑制p21通过泛素-蛋白酶体通路的降解。　　p21蛋白是细胞周期重要的调控因子，主要调控G1/S期细胞周期进程，我们发现干扰usp11表达时细胞S期比例增加，细胞G1/S期进程加快，而当在干扰usp11的同时过表达p21蛋白后，USP11丧失了对细胞周期的影响，表明USP11可以通过p21蛋白介导细胞周期G1/S期转换。　　为了明确USP11的生物学功能，我们通过MTT和克隆形成实验，发现在非小细胞肺癌细胞中，干扰usp11表达能够促进细胞增殖，而过表达usp11则能抑制细胞增殖，表明USP11很可能具有潜在的抑制非小细胞肺癌细胞增殖的功能活性。　　本课题的上述研究，将有助于揭示细胞内p21蛋白被稳定的分子机制，进一步拓宽我们对细胞周期调控理论的认识，明确USP11在非小细胞肺癌中的分子功能，为防治非小细胞肺癌提供新的靶标和切入点。