巨噬细胞炎症蛋白-1α、骨硬化蛋白在多发性骨髓瘤中的表达及相互关系的研究

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目的:探讨研究MIP-1α、Sclerostin在多发性骨髓瘤患者及骨髓瘤细胞系中的表达及其相关关系。方法:1.收集在桂林医学院附属医院血液科2013年9月至2015年6月收治的,根据张之南《血液病诊断及疗效标准》确诊的多发性骨髓瘤(MM)患者53名为实验组。以53名实验组、30名健康对照组及人多发性骨髓瘤细胞株RPMI-8226、H929为研究对象。收集实验组和对照组新鲜骨髓液,同时分别记录患者多项实验室数据和临床指标:β2-微球蛋白、血清钙离子、骨损害级别等。釆用ELISA测定实验组、对照组中骨髓液上清及细胞培养上清液中MIP-1α、骨硬化蛋白水平。2.通过应用特异性抗MIP-1α、骨硬化蛋白抗体,以加入相应抗体细胞培养组为实验组,以未加入抗体细胞培养组为对照组,具体分组为:(1)RPMI8226对照组;(2)RPMI8226+MIP-1α抗体干预组(3)H929对照组;(4)RPMI8226+Sclerostin抗体干预组;(5)H929+Scler ostin抗体干预组;(6)H929+MIP-1α抗体干预组;用ELISA、RT-PCR法检测细胞MIP-1α、骨硬化蛋白表达水平。结果:1.在MM患者及对照组实验中,MM患者骨髓中MIP-1α、骨硬化蛋白水平高于对照组,差异有统计学意义(p<0.01)。在MBD患者中,C组患者骨髓的骨硬化蛋白和MIP-1α水平明显高于A组和B组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组中骨髓中骨硬化蛋白水平与MIP-1α蛋白,β2-微球蛋白,aCa水平之间呈明显的正相关。骨硬化蛋白水平与bALP,HB,A LB之间呈负相关。而骨硬化蛋白水平与血清Ca、Plt、Scr、LDH、1,25(O H)D3之间却没有明确的相关性的表现;2.在体外实验中,两株细胞均分泌MIP-1α和骨硬化蛋白。但两种细胞分泌MIP-1α、骨硬化蛋白水平有差异(p<0.05),两组细胞中MIP-1α水平与骨硬化蛋白水平均呈正相关。加入抗M IP-1α抗体前后对比,发现两组细胞的MIP-1α、骨硬化蛋白表达水平与未加抗体的照组相比水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。而加入骨硬化蛋白抗体前后两组细胞的MIP-1α水平无明显差异(P>0.05)。结论:1.MIP-1α、骨硬化蛋白在大多数MM患者骨髓中及骨髓瘤细胞系中均有表达,并且不同细胞系表达水平不同;2.MIP-1α、骨硬化蛋白在多发性骨髓瘤中呈正相关表达,与瘤负荷及骨质破坏程度相关;3.在体外验证骨硬化蛋白是通过MIP-1α刺激瘤细胞分泌的,及具体机制不明。
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