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目的:探究p38MAPK信号通路对右美托咪定（Dex）抑制罗哌卡因诱导神经毒性的影响。方法:第一部分培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞,用不同浓度罗哌卡因处理体外培养的PC12细胞,相同浓度罗哌卡因处理不同时间,建立局麻药神经毒性的体外培养模型。不同浓度罗哌卡因处理的PC12细胞分为6组:对照组（C组）,0.5mmol/L罗哌卡因组（R0.5组）、1mmol/L罗哌卡因组（R1组）、2mmol/L罗哌卡因组（R2组）、4mmol/L罗哌卡因组（R4组）、6mmol/L罗哌卡因组（R6组）。2mmol/L罗哌卡因处理PC12细胞分为5组:对照组（C组）、1h组（T1组）、6h组（T6组）、12h组（T12组）、24h组（T24组）。两组均应用倒置相差显微镜镜下观察细胞形态学变化,CCK-8法检测细胞活力,Werstern Blot法检测Bax、Bcl-2、p-p38的蛋白相对表达水平。第二部分取对数期细胞分为5组:对照组（C组）、1μmol/LDex+罗哌卡因组（D1R组）、10μmol/L Dex+罗哌卡因组(D10R组)、100μmol/LDex+罗哌卡因组(D100R组)、罗哌卡因组（R组）。D1R组、D10R组、D100R组细胞分别用1μmol/L、10μmol/L、100μmol/LDex预处理30min,与R组一同加入罗哌卡因2mmol/L后继续培养24h,Hoechst33342/PI检测细胞坏死率,AV-FITC细胞凋亡试剂盒检测细胞凋亡率。第三部分检测p38MAPK信号通路对右美托咪定（Dex）抑制罗哌卡因诱导神经毒性的影响。将细胞细胞分为7组,2mmol/L罗哌卡因组（R组）、DMSO组、对照组（C组）、100μmol/L Dex组（D组）、10μmol/L SB203580（p38MAPK抑制剂）（SB组）、100μmol/LDex+罗哌卡因组（DR组）、10μmol/LSB203580+罗哌卡因组（SBR组）。C组即对照组,R组、DMSO组分别加入2mmol/L罗哌卡因、1μL DMSO培养24h,D组和SB组分别加入100μmol/LDex、10μmol/LSB203580处理30 min,DR组、SBR组同样分别用100μmol/L Dex、10μmol/L SB203580预处理30 min,然后加入2mmol/L罗哌卡因干预到24h。用免疫荧光（IF）和Werstern Blot法检测Bcl-2、Bax、p38、p-p38蛋白表达情况,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位的变化。结果:第一部分显微镜下观察到药物处理后的细胞出现凋亡改变,细胞体积缩小变圆,凋亡小体形成。且随着浓度梯度和时间梯度的不断增加,细胞总量依次递减,凋亡细胞比例依次增加。不同浓度的罗哌卡因处理PC12细胞,24h后得出结果是与C组相比,R1组、R2组、R4组、R6组细胞活力依次降低,且具有统计学意义（P0.05）。罗哌卡因处理不同时间后得出的结果是,与C组比较,T1组、T6组、T12组、T24组的细胞活力依次降低,且具有统计学意义（P0.05）。在Werstern Blot检测蛋白表达上,浓度梯度组中,C组、R0.5组、R1组、R2组、R4组、R6组的Bax、p-p38蛋白相对表达量、Bax/Bcl-2比率依次增加,Bcl-2蛋白相对表达量依次减少。且与C组相比,R0.5组、R1组、R2组、R4组、R6组的蛋白相对表达量均具有显著的统计学意义（P<0.05）。时间梯度组中,与C组相比,T1组、T6组、T12组、T24组Bax、p-p38蛋白相对表达量、Bax/Bcl-2比率依次增加,Bcl-2蛋白相对表达量依次减少,且均有显著统计学意义（P<0.05）。第二部分检测细胞坏死情况上,与C组相比,D100R组、D10R组、D1R组、R组细胞坏死率依次增多,具有显著统计学意义（P<0.05）。与R组相比,D100R组、D10R组、D1R组的细胞坏死率明显低于R组,具有显著统计学意义（P<0.05）。流式细胞术检测细胞凋亡情况,与C组相比,D100R组、D10R组、D1R组、R组细胞凋亡率依次增多,具有显著统计学意义（P<0.05）。与R组相比,D100R组、D10R组、D1R组的细胞凋亡率明显低于R组,具有显著统计学意义（P<0.05）。第三部分免疫荧光结果显示与C组、D组、SB组相比,DR组、SBR组、R组的Bcl-2蛋白表达明显减少,p-p38蛋白表达明显增加。Western Blot检测蛋白表达量,与C组相比,D组、SB组、DR组、SBR组、R组的Bax蛋白表达量、Bax/Bcl-2比率、p-p38蛋白表达量依次增加,Bcl-2蛋白表达量依次减少,且均具有统计学意义（P<0.05）;与D组相比,DR组、SBR组、R组的Bax蛋白表达量、Bax/Bcl-2比率、p-p38蛋白表达量依次增加,Bcl-2蛋白表达量依次减少,且均具有统计学意义（P<0.05）;与DR组相比,R组的Bax蛋白表达量、Bax/Bcl-2比率、p-p38蛋白表达量显著增加（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达量显著减少（P<0.05）。与R组相比,C组、DMSO组、D组、SB组、DR组、SBR组的Bax蛋白表达量、Bax/Bcl-2比率、p-p38蛋白表达量依次降低,Bcl-2蛋白表达量依次升高,且均具有统计学意义（P<0.05）。与C组比较,DR组、SBR组、R组的p38蛋白表达量显著增加（P<0.05）,与DR组相比,R组的p38蛋白表达量显著增加（P<0.05）。线粒体膜电位结果显示,与C组相比,D组、SB组、DR组、SBR组、R组的线粒体膜电位表达具有统计学意义,膜电位水平依次显著降低（P<0.05）;与D组相比,DR组、SBR组、R组的线粒体膜电位显著降低（P<0.05）;与DR组相比,R组的线粒体膜电位显著降低,具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.罗哌卡因的神经毒性随着浓度和时间梯度的增加而增加,且可通过促进PC12细胞p38的磷酸化,继而上调Bax/Bcl-2比值作用。2.右美托咪定可以在1～100u M的范围内剂量依赖性的降低罗哌卡因干预后的PC12细胞的坏死率和凋亡率。3.右美托咪定可以通过p38MAPK通路,增加下游p-p38的水平,下调促凋亡蛋白Bax的水平,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的水平,从而提高Bcl-2/Bax比值,减少线粒体膜电位丢失,从而减少神经毒性产生。