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番茄是一种非常重要的经济作物，其生产状况直接影响着蔬菜产业发展。番茄褪绿病毒是危害番茄的主要病毒之一，该病严重影响番茄的产量和品质，使番茄产业遭受巨大的经济损失。由于传统的病毒防治方法效率较低，不能从根本上解决番茄褪绿病毒，因此，使用分子生物学技术培育抗病品种成为控制番茄褪绿病毒病的最有效途径。基因工程中RNAi技术的快速发展，为番茄褪绿病毒病的防治提供了一个新策略。本研究借助RNAi技术，首先选择ToCVHsp70h基因片段作为RNA干涉区，构建含有Hsp70h基因反向重复序列的干扰载体，并通过农杆菌转化，获得抗ToCV的Micro-Tom转基因植株，并对其抗番茄褪绿病毒能力进行研究。主要结果如下： 1.成功构建了抗ToCVRNAi植物表达载体。 Hsp70h蛋白参与病毒复制的特殊过程。选择ToCVHsp70h基因的178bp基因片段作为干涉区，根据基因序列设计特异引物Hsp70h正向L/R和Hsp70h反向L/R。在引物5加入不同的酶切位点，控制正、反目的基因连接载体的方向。将PCR扩增得到的反向目的片段和正向目的片段先后插入到RNAi植物表达载体pFGC5941，构建含有ToCVHsp70h基因反向重复序列的RNAi植物表达载体pFGC5941-H2。通过PCR、酶切、测序验证，均证明抗ToCV的RNAi植物表达载体pFGC5941-H2构建成功，可用于进一步研究。 2.通过农杆菌介导番茄遗传转化，获得转基因番茄植株。 通过农杆菌介导的植株转化法，将RNAi植物表达载体pFGC5941-H2整合到农杆菌菌株EHA105中，对番茄Micro-Tom叶盘进行遗传转化。经抗生素筛选和脱菌培养获得了抗性芽，进一步进行生根培养后获得了完整的草铵膦抗性植株。经过抗性筛选获得22株阳性苗。对阳性植株进行PCR分子鉴定，检测到其中有4株（A、B、C、D）表现阳性。结果表明目的基因已经整合到番茄Micro-Tom中，获得4株转基因番茄。 3.转基因植株攻毒试验，表明ToCVHsp70h基因表达被抑制，转基因番茄植株抗ToCV能力增强。 对转基因番茄植株的接种番茄褪绿病毒，沉默Hsp70h基因的番茄植株褪绿症状明显轻于对照植株。在mRNA水平上检测该病毒，ToCVCP的表达量在4株转基因番茄表现出一定差异，C的表达量最低，其次是D、A、B，基因沉默植株毒量低于较对照组，表明Hsp70h基因表达被抑制，RNA干扰ToCVHsp70h基因为抗番茄褪绿病毒的研究提供了技术支持。