苹果抗病毒RNAi表达载体构建及转化烟草研究

来源 :分子植物育种 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fancysoul

【摘要】

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病毒病严重影响中国苹果生产。为创制抗病毒植物新材料，本研究采用Gateway技术构建了含3种苹果潜隐性病毒CP基因片段的RNAi植物表达载体，并对烟草进行了遗传转化。采用RT-PCR分

【作者】

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田莉莉牛良

【机构】

：

中国农业科学院郑州果树研究所

【出处】

：

分子植物育种

【发表日期】

：

2013年6期

【关键词】

：

苹果抗病毒 RNAi表达载体烟草遗传转化 Malus Virus resistance RNA interfere plant expression

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病毒病严重影响中国苹果生产。为创制抗病毒植物新材料，本研究采用Gateway技术构建了含3种苹果潜隐性病毒CP基因片段的RNAi植物表达载体，并对烟草进行了遗传转化。采用RT-PCR分别克隆获得了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒的CP基因保守区段，用重叠延伸PCR方法串联获得了902bp的大片段ALV用作干扰片段。先通过TOPO克隆将该片段克隆入载体pENTR／SD／D，构建了入门载体pENTR-ALV，再经LR反应使干扰片段ALV替换目标载体pHELLSGATE12上的ccdB基因，形成了同

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