Sly-miR159调控番茄果实采后衰老的表观遗传学机制研究

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miRNAs在影响植物生长发育及果实成熟衰老等方面发挥重要的作用。研究miRNAs调控番茄生长发育及果实成熟衰老的机制可以为了解植物表观遗传学衰老调控机制提供新的思路。果实采后衰老机制研究,对果实贮藏和流通具有重要的指导意义。本研究通过STTM(short tandem target mimic)和转基因工程技术构建了STTM-miR159和miR159过表达转基因番茄植株体系,探究了miR159及靶基因ACS8在番茄生长发育及成熟衰老中的功能,揭示了miR159对番茄果实采后成熟衰老的调控机制,主要研究结果如下:(1)对番茄果实发育过程中miR159和靶基因ACS8的表达进行了分析,发现miR159和靶基因ACS8在番茄花器官、果实幼果发育和果实萼片中的表达呈负相关。STTM-miR159转基因番茄对幼果的膨大发育起到了抑制作用,并减少了果皮细胞的层数和密度,减小了萼片的厚度。miR159过表达转基因株系则促进了番茄幼果的发育,果实子房不经授粉提前膨大,并增加了果皮厚度,产生的果实为无可育种子的单性果实。表明miR159和靶基因ACS8的表达参与果实生长发育过程。(2)miR159和靶基因ACS8参与了果实采前成熟的调控。STTM-miR159和miR159过表达转基因株系番茄都提前了果实从开花到破色的时间,STTM-miR159和miR159过表达转基因株系番茄果实破色时间平均为34 dpa和27 dpa。与野生型相比,STTM-miR159转基因株系延缓了果实从破色到红熟的过程,miR159过表达转基因株系促进了果实从破色到红熟的过程。表明miR159受到干扰或过表达时,均会影响果实的破色时间,说明miR159对和靶基因ACS8的调控影响了番茄果实的采前成熟。(3)miR159和靶基因ACS8参与了番茄果实的采后成熟衰老过程。STTM-miR159转基因株系明显延缓了番茄采后果实的成熟衰老,抑制了采后贮藏中番茄果实乙烯释放速率,影响了乙烯信号转导途径下游相关基因的表达。过表达miR159转基因株系显著缩短了采后番茄果实从破色到红熟的时间,提高了采后果实中乙烯的生成速率,下调了CTR1基因的表达量,上调了乙烯途径中ETR4、EIN2、EIL3和ERF1等基因的表达,其中ERF1基因的上调结果最为显著。表明miR159对靶基因ACS8的调控影响了乙烯信号转导途径,进而影响了采后番茄果实的成熟衰老。此外,miR159和靶基因ACS8还影响了番茄采后果实中营养成分的变化。 综上所述,miR159对靶基因ACS8的调控参与了番茄果实的生长发育和成熟衰老过程,本研究为miR159调控果实成熟衰老机制的研究提供了新的依据。
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