加味补阳还五汤对内皮损伤大鼠VEGF、ICAM-1表达的影响

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目的:建立颈动脉球囊内皮损伤动物模型,观察加味补阳还五汤对颈动脉内皮损伤后大鼠VEGF、ICAM-1表达的影响,探讨加味补阳还五汤修复损伤内皮的可能机制。  方法:选用健康雄性SD大鼠100只,清洁级,体重190±20g,随机分为中药组(n=30)、西药组(n=30)、对照组(n=30)、假手术组(n=10),适应性喂养1周后行颈动脉内皮球囊损伤造模。术后普通饲料喂养,中药组予加味补阳还五汤(1.47g/(kg.d))灌胃8周;西药组予阿托伐他汀钙片(0.33mg/(kg.d))灌胃8周,对照组予生理盐水(2ml/(kg.d))灌胃8周。术后8周腹腔内注入过量水合氯醛处死大鼠进行取材和病理切片制作,HE染色及弹力纤维染色后光镜下观察管壁增生情况,计算机图像分析内膜面积,观察加味补阳还五汤对新生内膜形成的影响,酶联免疫吸附法检测 ICAM-1水平,免疫组织化学染色法测定局部损伤组织 VEGF的表达,并进行图象分析,探讨加味补阳还五汤修复损伤动脉血管内皮的可能分子机制。  结果:本实验研究结果包括三部分内容。  1组织学观察:球囊内皮损伤术后,与假手术组对比,中药组、西药组、对照组均可见动脉内皮剥脱,个别处内弹力板破裂,内弹力板由正常时的波浪状变平坦,失去弹性。中药组、西药组新生内膜面积均低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);中药组、西药组新生内膜面积比较无明显差异(P>0.05)。  2免疫组织化学检测:血管内皮生长因子阳性颗粒主要在颈动脉内膜内皮细胞胞浆表达,内皮下平滑肌细胞胞浆和中膜有少量表达。对照组内膜不规则地增厚,内弹力板不连续,内膜增厚处向腔内扁平状或丘状隆起,大量泡沫细胞积聚,平滑肌细胞排列紊乱。中药组、西药组均可见到与对照组相似的病理表现,但内膜增生程度有不同程度的减轻。  3酶联免疫吸附法检测:中药组、西药组血管内皮生长因子表达均高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);中药组、西药组血管内皮生长因子比较无明显差异(P>0.05)。术后第4周、第8周,中药组、西药组分别与对照组比较见细胞间黏附分子-1水平均有显著差异(P<0.05);中药组与西药组细胞间黏附分子-1水平比较无明显统计学意义(P>0.05)。  结论:(1)大鼠颈动脉球囊损伤模型可以模拟冠心病内皮损伤及PCI术后再狭窄病理过程,为药理研究提供参考。  (2)加味补阳还五汤可影响颈动脉球囊内皮损伤模型大鼠血管内皮生长因子的表达,使血管内皮生长因子含量升高。  (3)加味补阳还五汤可调节颈动脉球囊内皮损伤模型大鼠细胞间黏附分子-1的表达,使血清细胞间黏附分子-1含量降低。  (4)加味补阳还五汤可减少实验大鼠颈动脉内皮损伤后血管内膜的增生,进而防治管腔狭窄。
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