目的明确血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激诱导肺动脉平滑肌细胞表型转化是否与有氧糖酵解相关及其机制。方法1、细胞模型的建立及实验分组采用组织贴块法培养大鼠原代肺动脉平滑肌细胞(PASMCs),分组实验中以PDGF-BB作为刺激因子,采用糖酵解途径的抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-DG),将PASMCs分为空白对照组、PDGF-BB(30ng/ml)组、PDGF-BB(30ng/ml)+2-DG(10mmol/l)组;在慢病毒过表达实验中,将PASMCs分为空白对照组、PDGF-BB(30ng/ml)组、PDGF-BB(30ng/ml)+去乙酰化酶sirtuin-3(SIRT3)过表达组、PDGF-BB(30ng/ml)+空载体组。2、检测相关指标使用蛋白免疫印迹(Western Blot)及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺动脉平滑肌细胞中平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、α-肌动蛋白(α-SMA)、钙调蛋白(calponin)、波形蛋白(vimentin)等表型指标的表达。使用细胞免疫荧光染色检测α-SMA表达水平。使用EDU检测PASMCs增殖情况。使用Western Blot检测PDGF-BB刺激后SIRT3的表达。在慢病毒过表达实验中,使用Western Blot、qRT-PCR检测葡萄糖转运蛋白-1(Glut1)及有氧糖酵解酶的表达水平。结果PDGF-BB刺激12小时后,大鼠肺动脉平滑肌细胞合成表型指标vimentin mRNA及蛋白水平升高(P<0.05),而收缩表型指标α-SMA、SM-MHC、calponin mRNA及蛋白表达水平则明显降低(P均<0.05),但2-DG逆转了PDGF-BB的这种作用。细胞免疫荧光实验及EDU增殖实验显示,PDGF-BB减少α-SMA阳性细胞,并导致PASMCs显著增殖,而2-DG可逆转该过程。此外,PDGF-BB刺激细胞后,SIRT3蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.05)。慢病毒过表达SIRT3实验中,与空白对照组相比,PDGF-BB可显著增加Glut1及有氧糖酵解酶己糖激酶2(HK2)、磷酸果糖激酶3(PFKFB3)mRNA及蛋白表达(P均<0.05);过表达SIRT3可显著抑制PDGF-BB对Glut1及糖酵解酶的影响(P均<0.05);但PDGF-BB+空载体组Glut1和糖酵解酶的mRNA及蛋白的表达水平则与PDGF-BB组比较无统计学意义(P均>0.05)。结论PDGF-BB通过SIRT3促进有氧糖酵解调控肺动脉平滑肌细胞的表型转化。