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癌症一直严重危害人类的健康,我国每年新发癌症人数为300万左右,每年因癌症死亡人数达到了270余万,相当于每一天有7300余人死于癌症。药物疗法迄今仍然是肿瘤治疗的三大方法之一。多西他赛(docetaxel)又称为多西紫杉醇,是由紫杉树的针叶中提取的第二代紫杉烷类化合物。它通过阻断微管系统从而阻断有丝分裂及有丝分裂间期的细胞功能而发挥抗肿瘤作用。临床上主要用于治疗乳腺癌、卵巢癌、肺癌、黑色素瘤等癌症。多西他赛作为脂溶性药物,溶解度较低,组织特异性较差,常引起中性粒细胞减少、外周神经毒性等毒副作用。临床上使用的制剂通过加入吐温-80作为增溶剂易引起超敏反应。因此选择合适的载药系统将药物传输至特定的病变部位,减少全身分布,减少给药剂量和给药次数,提高药物的治疗指数,降低毒副作用是目前急需解决的问题。肿瘤的靶向治疗是利用具有一定特异性的载体,将抗肿瘤药物定向地作用于肿瘤细胞,而不影响正常细胞或者组织的功能。与传统细胞毒化疗不同,肿瘤靶向治疗具有治疗指数高、毒副作用小的特点。因此本课题制备了两种具有良好抗肿瘤效果的多西他赛脂质体,提高了多西他赛的溶解度和肿瘤靶向性。1)多西他赛pH敏感脂质体；2)靶向因子RGD修饰的多西他赛pH敏感脂质体。pH敏感脂质体能够靶向低pH的肿瘤组织,发挥物理化学靶向作用,靶向因子RGD能够靶向肿瘤细胞表面高表达的整合素受体,发挥主动靶向的作用,从而提高药物的治疗效果。本文研究了两种脂质体的药剂学和生物学特征,探讨了其作为肿瘤治疗药物的应用前景。课题主要研究方法与结果如下：1.多西他赛pH敏感脂质体的研究采用溶解-超速离心法将游离药物与载药脂质体分离,建立了高效液相法测定脂质体中多西他赛的含量及包封率。以磷脂酰乙醇胺(PE)、胆固醇(CHOL)作为主要载体材料,琥珀酸胆固醇单酯作为酸敏感材料,以多西他赛作为模型药物。以包封率作为主要考察指标,考察了乙醚注入法、薄膜分散法、冻融法三种制备方法,最终选择薄膜制备法作为脂质体的制备方法。然后单因素考察了水化温度、水化时间、药脂比、胆固醇的量、琥珀酸胆固醇单酯(CHEMS)的量、水化转速、旋蒸温度因素对包封率的影响,在此基础上,采用正交设计对处方进行优化,选用药脂比、CHEMS的量、水化时间、水化温度作进行进一步考察,得到多西他赛pH敏感脂质体的最优处方与最佳制备工艺：PE35mg, DTX6mg, CHOL15mg, CHEMS15mg,水化温度为60℃,水化时间1.5h,水化转速为800rpm,旋蒸温度为40℃,包封率为86.40%,载药量为7.31%。在最优处方的基础上,以乳糖作为冻干保护剂,采用冷冻干燥法制备冻干制剂。得到的脂质体冻干粉末外观均匀疏松,具有良好的再分散性。透射电镜下观察制备的多西他赛pH敏感脂质体呈类球状,外观圆整,边缘清晰。动态光散射仪测得多西他赛pH脂质体粒径为203.32±3.2nm,多分散系数PDI为0.189±0.05,Zeta电势为-31.17±2.20mV。由稳定性试验得出,所制备的脂质体性质较为稳定,符合制剂制备的要求。2.RGD修饰的多西他赛pH敏感脂质体的研究采用多肽的固相合成将三肽RGD连接在CHEMS上,合成RGD-CHEMS,将生成的产物与PE、CHOL以适当的比例制备RGD修饰的多西他赛pH敏感脂质体(DTX/RGD-PLPS)。透射显微镜下观察所制备的脂质体呈类球状,且外观圆整无粘连。动态光散射仪测得的粒径为221.12±1.7nm,PDI为0.194±0.07,Zeta电势为-30.24±2.3mV。以多帕菲(?)作为对照,研究DTX-PLPS、DTX/RGD-PLPS在不同pH值(pH7.4、6.0、5.0、4.0)的含有0.5%吐温-80的磷酸盐缓冲液中的释放特性。结果显示与多帕菲(?)相比,药物包载于脂质体中后,其体外释放时间明显延长,且载药脂质体在酸性环境中的释放较生理环境pH7.4快,显示了一定的pH敏感性。3.载药脂质体的体外抗肿瘤评价本实验采用MTT法研究了多西他赛溶液、DTX-PLPS. DTX/RGD-PLPS对人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肺癌细胞(A549)及人肝癌细胞(HepG2)的细胞毒性作用。结果显示,脂质体材料对三种肿瘤细胞的存活率并无影响。相较于多西他赛溶液而言,两种载药脂质体制剂的体外抗肿瘤活性明显增强,抗肿瘤活性的强弱分别为DTX/RGD-PLPS>DTX-PLPS>DTX溶液,其半数抑制浓度IC50分别为：MCF-7：2.02±0.08、3.79±0.17、8.57±0.51μg/mL;A549：2.03±0.11、2.38±0.42、6.39±3.92μg/mL; HepG2:1.65±0.05、3.12±0.15、5.04±0.62μg/mL。细胞摄取实验结果表明,两种脂质体制剂在细胞内的摄取能力均强于游离的香豆素-6溶液,其中RGD修饰的脂质体在三种细胞中的蓄积程度明显高于未修饰组。因此我们得出脂质体具有较好的细胞相容性,能够将药物有效的传输进入细胞内,且靶向因子RGD修饰的脂质体具有较好的肿瘤靶向性,有望实现肿瘤靶向治疗高效低毒的目的。4.载药脂质体给药系统的体内药动学研究本实验考察了兔子耳缘静脉注射两种脂质体制剂与多帕菲(?)后药物在体内的药动学特性。结果显示,与多帕菲(?)相比,两种脂质体制剂在体内作用时间均显著延长。DAS2.0药物动力学软件分析的结果显示,三种制剂在兔子体内均符合二室模型,且两种脂质体制剂DTX-PLPS、DTX/RGD-PLPS的AUC值(19.51、16.31ug/L·h)均大于多帕菲(?)的AUC值(7.398μg/L·h)。说明制备的两种脂质体制剂具有较好的缓释作用并能显著能加药物的治疗效果。综上所述,本课题制备的脂质体包封率较高,提高了多西他赛的溶解度,且制备工艺简单,重现性及稳定性较好。并兼具物理化学靶向与主动靶向作用,能够靶向肿瘤细胞,显著提高抑瘤效果并降低了毒副作用。因此,本课题所制备的脂质体具有良好的肿瘤靶向性,是具有一定开发前景的癌症治疗制剂。