【摘 要】
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目的:初步探讨降真香水提取物提高光老化角质形成细胞（Human keratinocytes,HaCaT）模型氧化应激能力及机制,为开发降真香用于改善皮肤光老化提供理论依据。方法:1.用不同浓度梯度的降真香水提取物与HaCaT细胞共培养,应用CCK-8法测定HaCaT细胞的增殖率,筛选出对HaCaT细胞有效的、安全的浓度。2.使用辐射剂量为30、60、90mj/cm~2的中波紫外线（UVB）照射细胞
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目的:初步探讨降真香水提取物提高光老化角质形成细胞（Human keratinocytes,HaCaT）模型氧化应激能力及机制,为开发降真香用于改善皮肤光老化提供理论依据。方法:1.用不同浓度梯度的降真香水提取物与HaCaT细胞共培养,应用CCK-8法测定HaCaT细胞的增殖率,筛选出对HaCaT细胞有效的、安全的浓度。2.使用辐射剂量为30、60、90mj/cm~2的中波紫外线（UVB）照射细胞,筛选出使HaCaT细胞半致死的辐射剂量用于后续实验。3.对光老化HaCaT细胞模型进行分组,空白组不予UVB辐射及降真香水提取物干预,模型组予UVB辐射,不加降真香水提取物干预;实验组加入降真香水提取物干预后予UVB辐射建立光老化模型,用CCK-8法检测降真香水提取物对光老化HaCaT细胞模型增殖率的影响。4.利用前期测定的安全浓度的降真香水提取物干预HaCaT细胞后,建立光老化HaCaT细胞模型,检测降真香水提取物对光老化模型HaCaT细胞内活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）的含量,超氧化物岐化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）等抗氧化酶活力及总抗氧化能力（T-AOC）水平的影响。结果:1.CCK-8检测结果显示:与空白组相比,浓度为4mg/L-64mg/L浓度的降真香水提取物对HaCaT细胞的增殖率有明显的抑制作用,增殖率显著下降（P<0.05）;浓度为0.5mg/L-2mg/L的降真香水提取物对HaCaT细胞的增殖有促进作用,增殖率显著升高（P0.05）。因此选用浓度为0.5mg/L-2mg/L的降真香水提取物作为安全有效浓度用于后续实验。2.当辐射剂量达到60mj/cm~2时HaCaT细胞相对活力为53%,达到半致死状态,因此选用60mj/cm~2的辐射剂量用于建立光老化模型。3.与空白组相比,模型组、实验组的增殖率均显著降低（P<0.05）,但实验组与模型组相比,实验组的光老化模型HaCaT细胞的增殖率显著高于模型组（P<0.05）。4.与空白组相比,模型组细胞中的ROS、MDA含量显著升高（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活力及T-AOC水平显著降低（P<0.05）;经过浓度为2mg/L的降真香水提取物干预后,实验组细胞中的MDA含量较空白组降低（P0.05）,其余浓度（0.5mg/L、1mg/L）的降真香水提取物干预后,实验组细胞中的ROS、MDA含量均较空白组升高（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活力及T-AOC水平均较空白组降低（P<0.05）。但与模型组比较,实验组细胞中的ROS、MDA含量均显著降低（均P<0.05）,SOD、CAT、GPx活力及T-AOC水平均显著升高（均P<0.05）。结论:一定浓度（0.5-2mg/L）的降真香水提取物能提高光老化角质形成细胞对UVB辐射的防御能力;通过清除光老化HaCaT细胞内的ROS,降低MDA的含量,提高光老化HaCaT细胞内SOD、CAT、GPx等抗氧化酶的活力及T-AOC水平从而提高HaCaT细胞的氧化应激能力,可能是降真香水提取物提升HaCaT细胞抗光损伤的重要机制之一。
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