【摘 要】
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背景:随着结直肠癌发病率和死亡率的逐步上升,其早期诊断也愈发得到重视,现有的诊断技术需要不断的改进。第一部分内镜磁性成像技术对患者结肠镜检查体验的影响目的:评估低经验医师在结肠镜检查中应用内镜磁性成像技术对患者肠镜体验的影响;同时构建简易结肠镜作用检测装置,设计探索性研究,尝试以客观量化的方式观察应用内镜磁性成像技术后内镜对肠道作用情况,从而探讨内镜磁性成像技术改善肠镜体验的机制及其可能的降低并发
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背景:随着结直肠癌发病率和死亡率的逐步上升,其早期诊断也愈发得到重视,现有的诊断技术需要不断的改进。第一部分内镜磁性成像技术对患者结肠镜检查体验的影响目的:评估低经验医师在结肠镜检查中应用内镜磁性成像技术对患者肠镜体验的影响;同时构建简易结肠镜作用检测装置,设计探索性研究,尝试以客观量化的方式观察应用内镜磁性成像技术后内镜对肠道作用情况,从而探讨内镜磁性成像技术改善肠镜体验的机制及其可能的降低并发症风险的作用。方法:第一阶段:将594例患者随机分为普通肠镜组和内镜磁性成像辅助肠镜组后由4名低经验内镜医师行结肠镜检查,比较两组患者可视疼痛评分,插镜成功率,进镜时间,腹部按压情况,体位变换情况,操作难易度评分等指标。第二阶段:自行构建结肠镜作用检测装置,一名结肠镜初学者使用该作用检测装置随机分别行内镜磁性成像辅助及普通结肠镜检查各40例,比较两组在进镜过程中数字测力计显示的最大测量值,进镜时间以及内镜对肠袢的累积作用值。结果:在第一阶段中,MEI辅助肠镜组VAS评分低于普通肠镜组（2.5±1.6vs2.8±2.16,P=0.031）;MEI辅助肠镜组体位变换有效率高于普通肠镜组（60.5%vs32.4%,P=0.021）;MEI辅助肠镜组进镜成功率高于普通肠镜组（99%vs96.2%,P=0.032）;MEI辅助肠镜组自觉操作难度评分低于普通肠镜组（4.4±1.8 vs4.8±2.14,P=0.022）。在第二阶段,MEI辅助肠镜组进镜时间短于普通肠镜组（104.4±50.7s vs140.6±93.4s,P=0.037）;MEI辅助肠镜组测定最大数值低于普通肠镜组（0.3±0.2vs0.57±0.28,P<0.001）;MEI辅助肠镜组肠袢累积作用值小于普通肠镜组（10.6±8.28vs24.08±23.09,P<0001）。结论:1.MEI可帮助低经验内镜医师改善患者结肠镜检查体验;2.内镜磁性成像系统可以帮助低经验内镜医师结肠镜操作技术的提高;3.低经验内镜医师应用MEI系统后对乙降交界处肠袢这一主要疼痛来源部位的最大刺激降低是患者体验改善的可能机制。4.低经验内镜医师应用MEI系统后减少了乙降交界处累积肠袢扭曲程度,改善患者进镜过程中的整体感受是受检者体验改善的可能机制。5.低经验医师应用MEI系统后可能有利于降低结肠镜检查中肠道并发症的风险。第二部分KIF20B在结直肠癌转移中作用机制研究目的:研究KIF20B在结直肠癌转移中的作用及分子机制。方法:通过PCR和免疫组化手段分别测定了结肠癌组织中m RNA及蛋白水平。使用小干扰RNA沉默LOVO和SW480细胞中的KIF20B基因,慢病毒载体用于Gli1在上述细胞中的过表达。Transwell迁移和侵袭实验以说明细胞侵袭和迁移能力。Westernblot测定Gli1及EMT生物标志表达水平。应用荧光共聚焦显微镜观察KIF20B、肌动蛋白和肌动蛋白束相关蛋白在细胞内的分布及表达水平。Jasplakinolide和latranculin A药剂处理用于肌动蛋白骨架变化相关实验。结果:KIF20B在结肠癌组织中呈高表达,并与结肠癌侵袭及转移相关。KIF20B高表达能诱发EMT,促进结肠癌细胞侵袭和迁移。Gli1参与了KIF20B诱发的EMT过程,并处于其下游位置。KIF20B可聚集分布在结肠癌细胞突起中,影响细胞突起形成,影响EMT相关细胞突起侵足的形成。细胞突起相关肌动蛋白动态变化参与调控KIF20B诱发的EMT,肌动蛋白骨架稳定影响Gli1表达。结论:1.KIF20B在结肠癌组织中的表达与T分期,远处转移情况及患者预后相关,其表达水平可以作为结肠癌患者诊断及预后的预测因子。2.KIF20B通过上游调控Gli1/Snail诱发EMT促进结肠癌细胞侵袭和迁移。3.KIF20B可聚集分布于结肠癌细胞突起中,影响细胞突起肌动蛋白骨架变化,进而调控细胞突起,尤其是与EMT过程密切相关的特殊细胞突起侵足的形成来影响细胞侵袭及迁移。4.稳定的肌动蛋白细胞骨架结构是KIF20B通过Gli1诱发EMT发生时所必需的。
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