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传染性支气管炎(IB)是鸡的主要呼吸道疾病之一,给养鸡业造成了巨大的损失.S1蛋白是IBV主要的免疫原蛋白之一.尽管传统方法制备的疫苗在疾病的控制上曾经发挥了重要的作用,但现在需要的是更安全并容易和野生型病毒分离的新型疫苗.在这些方面,禽痘病毒载体疫苗有其特有的优势,构建了许多表达禽类病原体主要免疫原基因的重组禽痘病毒,而且已有部分产品投入使用.但是重组疫苗的免疫力与常规疫苗的免疫水平还存在一定的差距,所以提高重组禽痘病毒疫苗的免疫效力对于面临疾病威胁的养禽业有着特别重要的意义.干扰素具有抗病毒、抗肿瘤活性,是重要的免疫调节性细胞因子,它是由抗原或有丝分裂原激活的T细胞所合成、分泌的,对免疫系统的多种细胞具有调控作用.IFN-Ⅱ可促进抗原提呈细胞中主要组织相容性复合物的表达,从而放大体液免疫和细胞免疫.在体外既可以单独应用于疾病的防治,又可以与基因工程疫苗联合应用增强和改善其免疫效果.该研究分别构建出了在鸡痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制下的鸡IFN-Ⅱ转移载体和鸡IFN-Ⅱ+IBV S1基因重组鸡痘病毒转移载体.将转移载体转染至鸡痘亲本毒S-FPV-017预感染后的CEF中,经过数轮蓝斑筛选和纯化获得重组鸡痘病毒rFPV-IFN-Ⅱ和rFPV-IFN-Ⅱ-S1.PCR检测证明rFPV-IFN-Ⅱ和rFPV-IFN-Ⅱ-S1基因组中包含IFN-Ⅱ基因和S1基因.Western blotting和间接免疫荧光检测表明,rFPV-IFN-Ⅱ-S1表达了S1基因和IFN-Ⅱ基因.为了检测重组禽痘病毒rFPV-IFN-Ⅱ-S1对SPF鸡的保护效果以及鸡IFN-Ⅱ的佐剂效应,将112只四周龄的SPF鸡分平均为7组,分别接种rFPV-IFN-Ⅱ、S-FPV-017、rFPV-IFN-Ⅱ+IB弱毒苗、rFPV-IFN-Ⅱ-S1、rFPV-IBVS1、IB弱毒苗,并设立非免疫鸡为对照.抗体检测结果表明rFPV-IFN-Ⅱ-S1免疫后只能引起微弱的IBV抗体,明显低于rFPV-IBVS1和IB弱毒苗免疫组.但攻毒后,rFPV-IFN-Ⅱ-S1提供的保护力却好于rFPV-IBVS1和IB弱毒苗.攻毒后的病毒分离和PCR检测结果表明:rFPV-IFN-Ⅱ+IB弱毒苗、rFPV-IFN-Ⅱ-S1在第8d就为阴性,rFPV-IBVS1、rFPV-IFN-Ⅱ、IB弱毒苗免疫组在第10d为阴性,而S-FPV-017和对照组在第12d才全部为阴性.病理切片观察结果表明:rFPV-IFN-Ⅱ-S1和商品化的IB弱毒疫苗效果相当,只有轻微的病变,rFPV-IFN-Ⅱ+IB弱毒苗免疫鸡几乎没有病变,rFPV-IFN-Ⅱ和rFPV-IBVS1免疫组有病变,对照组病变严重且持续时间长.体重监测结果表明:接种rFPV-IFN-Ⅱ、rFPV-IFN-Ⅱ+IB弱毒苗、rFPV-IFN-Ⅱ-S1不影响增重,与空白对照组相比差异不显著.综合以上的实验结果,该研究构建的共表达鸡IFN-Ⅱ和IBV S1基因的重组鸡痘病毒能有效保护免疫鸡免受IBV的攻击,减轻疫苗接种的副反应,有望被开发为抗IB基因工程疫苗,为控制IBV的发生和流行提供新手段.