【摘 要】
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探讨染料木黄酮(genistein)对去势抵抗前列腺增殖的影响,以及对雄激素信号途径的抑制作用及分子机制,为植物化学物防治CRPC提供实验数据。方法：以22RV1、VCaP细胞为CRPC细胞模型,人正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照。(1)CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞免疫化学法检测Ki-67；(2)酶联免疫法检测PSA,二氢睾酮(DHT),睾酮(T)；(3)West
【机 构】
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成都医学院公共卫生学院 成都610500
【出 处】
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2017年四川省食品与营养学术年会
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探讨染料木黄酮(genistein)对去势抵抗前列腺增殖的影响,以及对雄激素信号途径的抑制作用及分子机制,为植物化学物防治CRPC提供实验数据。方法：以22RV1、VCaP细胞为CRPC细胞模型,人正常前列腺上皮细胞RWPE-1为对照。(1)CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期分布,细胞免疫化学法检测Ki-67；(2)酶联免疫法检测PSA,二氢睾酮(DHT),睾酮(T)；(3)Western Blot检测P53、CyclinD1、PCNA及de novo中各种催化酶表达,包括类固醇生成快速调节蛋白(StAR)、胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、胆固醇侧链裂解酶(CYP11A1)、由17α羟化酶/20-裂解酶(CYP17A1)、3-羟基类固醇合成酶(3βHSD)、醛酮还原酶(AKR1C3)、5α还原酶2(SRD5A2)及胞浆蛋白、核蛋白中AR的表达；(4)实时荧光PCR检测AR下游基因FKBP5、STEAP1、TMPRSS2表达；(5)激光共聚焦检测AR的表达及胞内定位；(6)免疫共沉淀法检测HSP90与AR的相互作用。结果：(1)genistein能有效抑制22RV1、VCaP细胞的增殖能力,且这种作用具有剂量时间效应；(2)genistein抑制CRPC细胞Ki-67、PCNA的表达,抑制CRPC细胞PSA的分泌,阻滞细胞周期于G2/M期；(3)genistein下调CRPC细胞AR的表达,抑制AR的核易位；(4)genistein下调CRPC细胞中AR下游基因STEAP1、TMPRSS2的表达；(5)genistein降低CRPC细胞中雄激素水平,下调从头合成途径关键酶AKR1C3、SRD5A2、CYP1 1A1及3βHSD的表达。结论： Genistein通过下调CRPC细胞从头合成途径中的AKR1C3、SRD5A2、CYP11A1及3βHSD的表达,阻断雄激素的从头合成,抑制AR信号通路的激活及核易位,发挥抗去势抵抗前列腺癌增殖的作用。
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