重叠延伸PCR相关论文
目的:基于重叠延伸PCR (SOE PCR)技术构建转录因子EB (TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。方法:根据SOE P......
PCR技术是现代分子生物学研究中最常用的技术,自1986年发明至今,在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多新PCR技术,本文对5种常用PCR技......
为寻找一种简洁高效的基因定点突变方案,利用Gibson组装技术对重叠延伸PCR法进行简化,并以克隆细胞周期蛋白依赖性激酶4基因单位点......
[目的]克隆人γ干扰素(hIFNγ)基因,借助自剪切肽P2A,构建hIFNγ-P2A-RFP(红色荧光蛋白)融合基因转座子表达载体,并在HEK293T细胞......
目的 构建表达绿色荧光蛋白的登革病毒感染性克隆质粒,为药物研究以及病毒生命周期的研究奠定基础.方法 利用重叠延伸PCR技术将绿......
为了研究高效广谱鸡基因工程重组复合抗病毒制剂,本研究采用重叠延伸PCR(Splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基......
免疫原基因的密码子优化是提高DNA疫苗免疫保护效果的有效策略.不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流......
为了研究高效广谱的猪基因工程抗病毒制剂,本研究采用重叠延伸PCR(Splicing by overlap extension-PCR,SOE-PCR)方法通过一基因柔......
不同物种间细胞在蛋白翻译过程中具有密码子使用的偏嗜性,鸡与A型流感病毒保护性免疫原HA蛋白氨基酸密码子使用频率存在着明显差异......
目的:LRRFIP1(Leucine-rich repeat(in Flightless I)interacting protein-1,富亮氨酸重复序列(Fli-1)相互作用蛋白-1),该蛋白可与......
[目的]获得aveD基因定点突变株,为阿维菌素的遗传育种提供理论依据。[方法]采用重叠延伸PCR技术对aveD基因进行定点突变,并通过体......
目的:构建含β地中海贫血(简称β地贫)-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒标准品。方法:以含β珠蛋白野生型基因的质粒DNA为......
目的:BCR-ABL SH3结构域双位点突变体构建,探讨其促进CML细胞株凋亡机制,为CML治疗奠定基础。方法:采用重叠延伸PCR 扩增双突变体,构建......
目的:构建人野生型和c.454C>T突变型血管内皮生长因子A(VEGFA)真核表达载体。方法:采用反转录聚合酶链反应扩增人VEGFA基因,用限制......
萜类化合物是自然界中分布最广的一类天然产物家族,目前已发现有5万多种。萜类化合物有共同的合成前体异戊烯基焦磷酸(IPP)与二甲......
目的:利用重叠延伸PCR合成风疹病毒E1基因的抗原肽段,构建其原核表达载体并表达蛋白,为进一步获得高质量的rE1重组抗原肽奠定基础......
目的鉴定抗原人干扰素α1b(huIFN-α1b)与1株全人源抗体蛋白AIFNa1IgG1的结合表位。方法从正常人分离纯化淋巴细胞并抽提mRNA进行C......
目的构建葡萄糖调节蛋白75(GRP75)不同结构域、不同形式突变体与线粒体信号肽重组蛋白并鉴定其亚细胞定位。方法通过重叠延伸PCR,......
目的构建含β地中海贫血(简称β地贫)IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒。方法以含β珠蛋白野生型基因的质粒DNA为模板,采用重叠延伸PC......
通过将马铃薯抗晚疫病基因RB、R3a编码区克隆到具有组成型CaMV35S强启动子的双元表达载体上,结合农杆菌介导的瞬时表达,分析过表达......
大白菜(B.rapa L.ssp.pekiensis)起源于中国,是我国重要的蔬菜作物之一。病毒病是大白菜生产中的三大病害之一,严重影响了大白菜的......
化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)是昆虫感受系统中的重要蛋白,是昆虫适应环境并与寄主植物协同进化的结果。对CSPs结合特性......
猪囊尾蚴病是猪肉绦虫的幼虫(猪囊尾蚴)寄生于猪的肌肉和其他器官中所引起的一种寄生虫病,又称猪囊虫病。是一种散发性、传染性寄......
本研究以PPV VP2为基础,通过定点突变的方法研究了Cys在VLPs高级结构和免疫原性中的作用,旨在寻找利于外源基因插入的位点,为以PPV......
山羊关节炎—脑炎(CAE)是由反转录病毒科慢病毒属山羊关节炎脑炎病毒(CAEV)引起的山羊的慢性传染病,CAEV可引起潜伏感染并呈世界性分布,......
目的:
甘丙肽(galanin,GAL)是1983年发现的一种29氨基酸的神经肽(人甘丙肽为30个氨基酸),广泛存在于许多物种的神经系统,在人中枢......
目的:克隆C57BL/6小鼠重组甘丙肽基因,构建其过表达转基因载体,为制作转基因动物奠定实验基础。
方法:用聚合酶链式反应(polymera......
木聚糖酶在造纸、饲料、食品以及能源等领域的应用价值已经得到了肯定,但由于纸浆处理通常是在高温条件下进行,在饲料制粒加工中也......
通过生物信息学分析发现,pprM基因含有冷休克DNA结合域.利用Overlap PCR方法获得pprM基因DNA结合域缺失的基因片段pprM△CSD后,酶......
利用基因重组技术,分别克隆木薯SBEⅠ基因ORF中的494 bp的片段和SBEⅡ基因ORF中的340 bp的片段;并通过重叠延伸PCR方法,扩增融合SB......
目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA......
根据OC-1△D86基因序列.设计合成了7条寡核苷酸片段.通过重叠延伸PCR技术合成了OC-I△D86基因,利用设计好的BamH1/Xho I酶切位点将......
背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体.材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重......
该文从挂篮荷载计算、施工流程、支座及临时固结施工、挂篮安装及试验、合拢段施工、模板制作安装、钢筋安装、混凝土的浇筑及养生......
目的构建mBD2与mBD3融合基因的真核表达载体,检测其在MDCK细胞中的表达情况,并探讨其抗病毒特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD2与m......
应用多个抗原袁位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞袁位预测及分析,从中选取了......
目的:构建IFN-β信号肽序列与白细胞介素18(IL-18)成熟肽的重组嵌合分子.方法:从BALB/c鼠基因组DNA扩增IFN-β信号肽序列;由小鼠Pr......
以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因.利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串......
目的:构建cblN/Zap嵌合分子, 稳定转染Jurkat细胞后观察对细胞TCRζ的影响.方法: 提取Jurkat细胞的总RNA并反转录为cDNA, 以其作为......
目的:合成人β防御素4(HBD4)基因并构建其克隆载体.方法:根据GenBank中HBD4结构基因的序列, 设计合成了6条长度为32 ~60 bp的寡聚核......
基于对人类肥胖病的研究,推测肥胖基因可能是影响家畜脂肪沉积的一个重要候选基因.研究以藏猪为实验材料,利用重叠延伸PCR方法合成......
目的 克隆表达出能够抑制补体活化的双功能域小分子补体受体1型(complementreceptor type 1,CR1)衍生物.方法 从外周血提取总RNA,......
在功能基因组学时代,对基因的功能研究将涉及到大量的载体构建,为建立一种链霉菌外源基因多拷贝表达的载体构建方法,本研究采用重......
应用多个抗原表位预测软件对微小隐孢子虫CP15、P23和CP15/60三个子孢子表面抗原的氨基酸序列进行T细胞表位预测及分析,从中选取了......
为探索治疗禽流感的方法,本实验从免疫H5N1亚型禽流感疫苗的猕猴淋巴细胞中提取总mRNA并扩增重链和轻链可变区(VH、Vλ和Vκ),用重叠......
【目的】对大肠杆菌噬菌体phiV10第45个基因编码蛋白PNE45进行原核表达,并检测其酶活性。【方法】设计并合成10段密码子优化的寡核......
【目的】探索重叠延伸PCR法在昆虫化学感受蛋白基因点突变上的应用,研究半胱氨酸(Cys32)对小菜蛾(Plutella xylostella)化学感受蛋白1(P......
目的:构建雄激素受体基因第一外显子区CAG重复序列缺失的突变重组体,观察CAG重复序列的有,无对雄激素受体转录及表达的调控作用。方法......