【摘 要】
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目的 在293T和Mel细胞中研究RNA干扰(RNA interference, RNAi)对绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)表达的沉默作用.方法以巢式PCR方法从人胚肾293T细胞中克隆出依赖于RNA 聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成; 构建能抑制eGFP特异性表达的RNAi载体(TR1).将eGFP载体和RNAi
【机 构】
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200040,上海交通大学医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学遗传研究所,200040,上海交通大学医学遗
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目的 在293T和Mel细胞中研究RNA干扰(RNA interference, RNAi)对绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)表达的沉默作用.方法以巢式PCR方法从人胚肾293T细胞中克隆出依赖于RNA 聚合酶Ⅲ的H1启动子,并用于驱动RNAi片段的合成; 构建能抑制eGFP特异性表达的RNAi载体(TR1).将eGFP载体和RNAi干扰载体共转染293T和Mel两类细胞中,应用荧光显微镜观察、逆转录-PCR、荧光辅助细胞分选技术和定量逆转录-PCR方法分析上述细胞中RNAi对eGFP表达的抑制情况. 结果 RNAi载体能有效地使293T和Mel细胞中红系特异的eGFP表达量均降低约50%以上. 结论本文构建的RNAi载体能有效的抑制目的基因eGFP在细胞中的表达。
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目的 为了探讨2型糖尿病(diabetes mellitus, DM)患者血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme ,ACE)基因与运动诱发的隐性心肌缺血(exercise-induced silent myocardial ischemia, SI)的关系.方法选择静息心电图正常的2型DM患者108例和50名健康人.采用踏车运动试验进行筛选SI.应用PCR技术
目的 探讨家族性石骨症的临床及X线表现特点.方法对59例石骨症患者临床资料作回顾性总结分析. 结果在家族性病例中以恶性型(幼儿型)居多,多在Ⅰ、Ⅱ代发病,偶见连续三代发病者.散发型中则以良性型(成人型)为主.X线表现以骨质硬化,髓腔闭塞为基本特征,椎体"夹心征"及髂骨"同心圆征"为其特征性表现.结论临床工作中要注重对石骨症患者进行家系调查,尤其对有遗传倾向者,有必要对胎儿期进行检测,对优生优育有重
目的 介绍变性高效液相色谱(denaturing high-performance liquid chromatography,DHPLC)技术在儿童型脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy ,SMA)基因诊断中的应用.方法 PCR扩增25名正常人、1份标准样品及25例SMA患者运动神经元生存基因(survival motor neuron, SMN)第7外显子及其侧翼区域
患者 男，足月顺产，16岁，因皮肤鱼鳞样变16年，走路不稳7年入院。患者出生时皮肤即呈鱼鳞样，斑片状，见于四肢、躯干、颈部。发育较同龄小孩差。7岁时，下肢僵硬，走路经常摔跤，6年后不能行走。9岁时开始出现双手抖动，经常出现发作性的全身抽搐，发作时神志不清，多住睡熟后发作。说话缓慢，欠清，饮水呛咳。学习成绩越来越差，最后已不能上学。全身瘙痒，畏光，双眼视力下降，视物重影。
目的 检测中国苯丙酮尿症(phenylketonuria,PKU)患者苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase, PAH)基因新的突变位点.方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性及DNA直接测序检测40例经典型PKU患者和30名正常对照的PAH基因.结果在PAH基因上共发现11种突变和3种多态,30名正常对照者PAH基因未发现异常.结论经与国际PAH基因突变数据库比较,确认
先证者(Ⅲ11) 男,36岁,未婚,身高135 cm,智力正常,头颅增大,前额突出,马鞍形鼻梁,嘴唇肥厚向外突.胸椎后突,腰椎前突,臀部肥大,胸腔扁小,肋骨较常人短,手指粗短,下肢呈弓形,走路摇摆,象鸭步,四肢肌力正常,能胜任日常工作。
先证者(Ⅲ1) 女,48岁,4年前无任何诱因出现头颈部无规律摆动,面部不自主多动,幅度较大。