【摘 要】
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目的探讨褪黑素对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)焦亡的影响及其机制。方法取传代培养的HLECs分为5个组，其中正常对照组常规培养，模型对照组于100μmol/LH2O2条件下培养，褪黑素组、维生素E组和维生素E溶剂组分别用1×10-6mol/L褪黑素、100μmol/L维生素E和维生素E溶剂预处理后，用100μmol/LH2O2继续培养，收集细胞待检测。为进一步探讨褪黑素的作用机制，将细胞分为7个组，其中正常对照组常规培养；模型对照组细胞于100μmol/LH2O2条件下培养；核转
【机 构】
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目的探讨褪黑素对过氧化氢(H2O2)诱导的人晶状体上皮细胞(HLECs)焦亡的影响及其机制。
方法取传代培养的HLECs分为5个组，其中正常对照组常规培养，模型对照组于100 μmol/L H2O2条件下培养，褪黑素组、维生素E组和维生素E溶剂组分别用1×10-6 mol/L褪黑素、100 μmol/L维生素E和维生素E溶剂预处理后，用100 μmol/L H2O2继续培养，收集细胞待检测。为进一步探讨褪黑素的作用机制，将细胞分为7个组，其中正常对照组常规培养；模型对照组细胞于100 μmol/L H2O2条件下培养；核转录因子E2相关因子2短发夹RNA(shNrf2)阴性对照组和shNrf2组细胞分别用shNrf2阴性对照和shNrf2慢病毒转染，并于终浓度100 μmol/L H2O2条件下培养；褪黑素组细胞在终浓度1×10-6 mol/L褪黑素条件下培养，然后加入终浓度100 μmol/L H2O2继续培养；褪黑素 shNrf2阴性对照组和褪黑素 shNrf2组细胞首先分别采用shNrf2阴性对照或shNrf2慢病毒转染，再于终浓度1×10-6 mol/L褪黑素和终浓度100 μmol/L H2O2条件下培养，收集各组细胞。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性，白细胞介素(IL)-1β和IL-18浓度；采用流式细胞术检测各组细胞中活性氧簇(ROS)的荧光强度；采用Western blot法检测各组细胞中Nrf2、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、caspase-1 p20、GSDMD-N蛋白的表达。
结果ELISA法检测发现，与模型对照组相比，褪黑素组和维生素E组细胞培养上清液中LDH活性及IL-1β和IL-18浓度均有不同程度的下调，差异均有统计学意义(均P
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